[发明专利]一种固相多肽合成奥米加南的制备方法有效

申请号：	201110035559.4	申请日：	2011-02-10
公开（公告）号：	CN102167731A	公开（公告）日：	2011-08-31
发明（设计）人：	周逸明;崔颀;蔡华成	申请（专利权）人：	周逸明;上海苏豪逸明制药有限公司
主分类号：	C07K7/08	分类号：	C07K7/08;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04
代理公司：	上海欣创专利商标事务所 31217	代理人：	顾大平
地址：	200040 上海***	国省代码：	上海;31
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	一种多肽合成奥米加南制备方法
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【说明书】：

技术领域

本发明涉及一种奥米加南(Omiganan)的制备方法，具体涉及固相多肽合成奥米加南的制备方法。

背景技术

中文名：奥米加南

英文名：Omiganan

CAS号：204248-78-2

分子式：C₉₀H₁₂₇N₂₇O₁₂

分子量：1779.0

氨基酸序列：Ile-Leu-Arg-Trp-Pro-Trp-Trp-Pro-Trp-Arg-Arg-Lys-NH₂

奥米加南是一个人工合成的12肽。目前已经进入美国FDA申报的临床三期试验末期。其原研公司Cadence Pharma在2010年9月对外宣布，奥米加南的临床三期试验结果可观，该产品将在近期被FDA批准上市，用于治疗和预防导尿管插管引起的感染。

奥米加南在美国已有4项相关专利申请，专利持有者均为原研者Cadence Pharma。主要内容牵涉该药物的适应用途以及药剂配方，其中US 6835536特别保护了该制剂配方关于泌尿系统感染治疗的靶向性。但并没有发现该多肽序列以及化学合成制备的相关专利申请。

在中国知识产权专利库中，尚未查询到公开的有关奥米加南的专利或专利申请。

发明内容

本发明的目的是公开一种固相多肽合成奥米加南的制备方法。本发明提出了一条较适当的路线，使用固相法合成奥米加南，且收率较高。

本发明的技术方案包括以下步骤：

(1)以Rink Amide MBHA树脂为起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有Fmoc-保护基团的氨基酸，最后一个氨基酸使用Boc-Ile-OH，获得保护的十二肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团；

(2)切肽，同步进行脱侧链保护基团，获得粗品；

(3)粗品经制备型HPLC(C18柱)分离纯化，加入15ml盐酸处理，减压去除溶剂，冻干后，制得奥米加南精品。

奥米加南有4个碱性氨基酸，其中1个Lys，3个Arg。另有4个Trp，因此给多肽合成带来一定的困难。本发明采用独特组合的工艺来制备奥米加南，取得了意想不到的效果。本发明以Rink Amide MBHA树脂为起始原料，与树脂缩合的第一个氨基酸采用Fmoc-Lys(Boc)-OH，并用醋酐封闭树脂上未反应的氨基。然后，逐个与Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Leu-OH、Boc-Ile-OH进行缩合反应，得到Boc-Ile-Leu-Arg(Pbf)-Trp-Pro-Trp-Trp-Pro-Trp-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-树脂；用特殊的切肽试剂(HCl/i-PrOH/DCM/Na₂S＝1/3.5/4/1.5)将多肽从树脂上切落；用特殊流动相(0.2MNH₄SO₄/乙腈＝7.5/2.5)进行分离纯化；得到纯度大于98％的奥米加南。工艺流程如下：

Rink Amide MBHA-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Lys(Boc)-OH；③醋酐

Fmoc-Lys(Boc)-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Arg(Pbf)-OH

Fmoc-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Arg(Pbf)-OH

Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Trp-OH

Fmoc-Trp-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Pro-OH

Fmoc-Pro-Trp-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-树脂

↓①PIP；②HBTU/HOBt，Fmoc-Trp-OH