[发明专利]草鱼呼肠孤病毒快速检测试纸及其制备、使用方法

权利要求书

1.草鱼呼肠孤病毒快速检测试纸，其包括：保藏号为：CCTCC-C201103杂交瘤细胞所分泌的抗草鱼呼肠孤病毒、胶体金标记的单克隆抗体C(简称：金标单抗C)；保藏号为：CCTCC-C201104杂交瘤细胞所分泌的抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体D(简称：单抗D)和羊抗小鼠IgG；适当尺寸的不干胶载体板；

其特征在于在该载体板的中间部设有由粘贴包被有单抗D(又称：检测线)和羊抗小鼠IgG(又称：质控线)的硝酸纤维膜制成的检测层；与该层相延续的两端设置吸水纸，分别构成加样端吸水层和手持端吸水层；在检测层的检测线的远端与加样端吸水层交界处，设有载有金标单抗C的玻璃纤维膜，该膜一端部分设置在加样端吸水层之下，其另一端部分设置在检测层之上。

2.根据权利要求1所述草鱼呼肠孤病毒快速检测试纸，其特征在于：所述的胶体金标记的单克隆抗体C，其制备方法如下：

(1)胶体金的制备：以公知的方法，按一定的配比将氯金酸与柠檬酸三钠混合并加热制备成胶体金溶液，制得的胶体金的颗粒大小为10-20nm；

(2)胶体金标记的单克隆抗体C的制备：将单克隆抗体C加入到上述(1)步的胶体金溶液中，慢搅混匀，加入牛血清白蛋白，离心后的沉淀用含有1-10％牛血清白蛋白和0.3-3％吐温-20的磷酸盐缓冲液悬起，加入叠氮钠，制成胶体金标记的单克隆抗体C；

(3)载有胶体金标记的单克隆抗体C的玻璃纤维膜的制备：将上述(2)步制成的胶体金标记的单克隆抗体C，按每平方厘米700-1000μl喷在玻璃纤维膜上，冷冻干燥，4℃保存备用。

3.权利要求1所述草鱼呼肠孤病毒快速检测试纸的使用方法，其特征在于：将该试纸的加样端吸水层插入或在其上滴加被检测样品，5-10分钟内在位于检测层上的检测线和质控线处显示红色，即双红线，表示草鱼呼肠孤病毒阳性和检测试纸有效。

4.根据权利要求3所述草鱼呼肠孤病毒快速检测试纸的使用方法，其特征在于：所述的检测样品制备的过程是：取被检草鱼肾脏加入至离心管中，按质量/体积比1∶(5-10)(g/ml)加入0.01mol/LpH为6-8的磷酸盐缓冲液，用捣碎棒将草鱼肾脏捣碎，使病毒释放于该离心管液体中，即制成检测样品。