[发明专利]辅助鉴定猪链球菌2型与猪链球菌7型的专用引物及其应用有效

专利信息
申请号: 201110041448.4 申请日: 2011-02-21
公开(公告)号: CN102146468A 公开(公告)日: 2011-08-10
发明(设计)人: 刘文军;毕玉海;李晶 申请(专利权)人: 中国科学院微生物研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/14;C12N15/11
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;任凤华
地址: 100101 北京市朝阳区北辰*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 辅助 鉴定 链球菌 专用 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.辅助鉴定猪链球菌2型和/或猪链球菌7型的专用引物,由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。

2.权利要求1所述专用引物在制备辅助鉴定猪链球菌2型和/或猪链球菌7型的试剂盒中的应用。

3.一种辅助鉴定猪链球菌2型和/或猪链球菌7型的试剂盒,包括权利要求1所述专用引物。

4.权利要求1所述专用引物或权利要求3所述试剂盒在辅助鉴定猪链球菌2型和/或猪链球菌7型中的应用。

5.辅助鉴定猪链球菌2型和/或猪链球菌7型的方法,为方法I或方法II;

所述方法I包括如下步骤:

(1)提取待测细菌的基因组DNA;

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,用专用引物进行PCR扩增;如果得到了211bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的猪链球菌2型;如果得到了347bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的猪链球菌7型;如果没有得到211bp或347bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的非猪链球菌2型且为候选的非猪链球菌7型;所述专用引物由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成;

所述方法II包括如下步骤:

(1)提取待测细菌的基因组DNA;

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,分别用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增;如果应用所述引物对甲得到了211bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的猪链球菌2型;如果应用所述引物对甲没有得到211bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的非猪链球菌2型;如果应用所述引物对乙得到了347bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的猪链球菌7型;如果应用所述引物对乙没有得到347bp的PCR扩增产物,待测细菌为候选的非猪链球菌7型;所述引物对甲是序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成的引物对;所述引物对乙是序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于:所述待测细菌为猪链球菌2型、猪链球菌7型、猪大肠埃希氏菌、猪布氏杆菌或金黄色葡萄球菌。

7.鉴别猪链球菌2型和猪链球菌7型的方法,为方法III或方法IV;

所述方法III包括如下步骤:

(1)提取待测细菌的基因组DNA;所述待测细菌为猪链球菌2型或猪链球菌7型;

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,用专用引物进行PCR扩增;如果得到了211bp的PCR扩增产物,待测细菌为猪链球菌2型;如果得到了347bp的PCR扩增产物,待测细菌为猪链球菌7型;所述专用引物由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成;

所述方法IV包括如下步骤:

(1)提取待测细菌的基因组DNA;所述待测细菌为猪链球菌2型或猪链球菌7型;

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,分别用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增;如果应用所述引物对甲得到了211bp的PCR扩增产物,待测细菌为猪链球菌2型;如果应用所述引物对乙得到了347bp的PCR扩增产物,待测细菌为猪链球菌7型;所述引物对甲是序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成的引物对;所述引物对乙是序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对。

8.一种检测来自死亡动物的样品中是否携带猪链球菌2型和/或猪链球菌7型的方法,包括如下步骤:

(1)提取待测样品的基因组DNA;

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,用专用引物进行PCR扩增;如果得到了211bp的PCR扩增产物,待测样品疑似含有猪链球菌2型;如果得到了347bp的PCR扩增产物,待测样本疑似含有猪链球菌7型;如果没有得到211bp或347bp的PCR扩增产物,待测样本疑似不含有猪链球菌2型和猪链球菌7型;所述专用引物由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。

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