[发明专利]用于研究肝细胞癌上皮间质样变的动物模型的构建方法

权利要求书

1.一种用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，取实验动物，在超声设备引导下肝脏原位接种肿瘤细胞，动态观察上皮间质样变相关指标变化以及肺转移情况。

2.如权利要求1所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的实验动物为BALB/c裸鼠或非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷小鼠。

3.如权利要求1所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的超声设备为配备有高频探头的彩色多普勒超声设备。

4.如权利要求1所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的肝脏原位接种肿瘤细胞的方法为肝实质注射肝癌细胞。

5.如权利要求1所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的动态观察上皮间质样变相关指标变化以及肺转移情况的方法为：接种后第一周开始，每隔一周处死动物，直到接种后第六周；将处死的动物解剖、取出肝脏及肺脏，脱水包埋成蜡块；将肝脏切片，免疫组织化学染色检测不同时期肝癌组织及癌旁组织中上皮间质样变相关指标变化，将肺脏连续切片，计数肺转移率和转移病灶数。

6.如权利要求5所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的免疫组织化学染色方法为链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。

7.如权利要求5所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的上皮间质样变相关指标为上皮型钙粘素、神经型钙粘素、波形蛋白、α平滑肌肌动蛋白和Snail蛋白中的一种或几种。

8.如权利要求5所述的用于研究肝细胞肝癌上皮间质样变动态过程的动物模型的方法，其特征在于，所述的肺转移灶计数方法为：肺连续切片，经苏木精-伊红染色，显微镜下观察计数肺转移率和病灶转移数。