[发明专利]一种应用RAPD-PCR确定饮用水源水遗传毒性的方法无效
| 申请号： | 201110043562.0 | 申请日： | 2011-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN102154486A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 陆根法;吴以中;戴明忠;刘宁;夏晶;朱沁园 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 汪旭东 |
| 地址： | 210093 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 应用 rapd pcr 确定 饮用 水源 遗传 毒性 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种应用RAPD-PCR确定饮用水源水遗传毒性的方法，其步骤为：
（1）采用待分析饮用水源水饲喂小鼠，并分别以纯净水与一定浓度的毒性物质溶液饲喂的小鼠作为阴性对照与阳性对照；
（2）提取小鼠DNA，选用RAPD分子标记技术进行遗传分析，分别以随机引物对小鼠的肝脏细胞基因组进行RAPD扩增，并对扩增条带进行多态性分析。
2.根据权利要求1所述的应用RAPD-PCR确定饮用水源水遗传毒性的方法，其特征在于步骤（2）中采用电泳并拍照后获得电泳图片条带进行所述的多态性分析。
3.根据权利要求1所述的应用RAPD-PCR确定饮用水源水遗传毒性的方法，其特征在于：所述的RAPD的反应体系为50ngDNA模板，10×buffer2.5μl，dNTP200μmol/L，Mg2+2.5mmol/L，引物0.8μmol/L，Taq酶2U；用灭菌双蒸水将体积补至25μl。
4.根据权利要求1所述的应用RAPD-PCR确定饮用水源水遗传毒性的方法，其特征在于所述的RAPD扩增程序为94℃预变性5min；94℃变性1min，35℃退火1min，72℃延伸2min，40个循环后72℃延伸10min。
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