[发明专利]一种水晶兰苷单体的制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于中药提取领域，具体涉及一种水晶兰苷单体的制备方法。

背景技术：

巴戟天为茜草科巴戟天属植物。具有补肝肾、强筋骨，祛风湿的功效，用于治疗阳痿遗精，宫冷不孕，月经不调，少腹冷痛，风湿痹痛，筋骨痿软等症。

据文献报道，巴戟天中的环烯醚萜苷类成分水晶兰苷具有较强的抗炎、镇痛作用，从药效学角度阐明了水晶兰苷为巴戟天祛风湿的物质基础成分。

水晶兰苷极性大，溶于乙酸乙酯、正丁醇、丙酮，易溶于乙醇、甲醇、含水醇溶液和水。

目前几乎只有对巴戟天的根的各成分进行了研究，而对巴戟天其他部位(如茎与叶)却少有报道。彭朵花等的研究表明，巴戟天茎中水晶兰苷含量约为根与叶的1.5倍。

现有技术在水晶兰苷分离纯化手段上多采用硅胶柱层析等传统方法，生产周期长，得率低，纯度不高。如专利(申请号为200910311303.4)“一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方法”，该专利公开的方法包括乙醇溶液提取、乙酸乙酯萃取、正丁醇萃取、过滤进一步除杂、通过制备型高液相色谱分离水晶兰苷、大孔树脂富集、干燥等步骤，该方法操作繁复，且水晶兰苷在正丁醇中溶解度不是很大，很难萃取完全。

发明内容：

本发明目的是提供一种水晶兰苷单体的制备方法，解决了纯度和得率不高的问题

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种水晶兰苷单体的制备方法，提取、澄清剂除杂、大孔树脂纯化、高速逆流色谱精制、喷雾干燥，具体包括以下步骤：

(1)以巴戟天茎为原料，粉碎，在常压下，加入12-20倍量(v/w)水60-70℃下保温浸渍3-5h，超声处理20-40min，合并提取液，减压除去部分溶剂，得浓缩提取液；

(2)向步骤(1)所得浓缩提取液中加入0.3-1.5％壳聚糖，醇沉浓度为55-85％，过滤，滤液进行高速离心分离，得澄清液；

(3)将步骤(2)所得澄清液浓缩至无醇，上大孔树脂柱纯化，水和50％乙醇溶液洗脱，收集醇洗脱液，蒸干，得到水晶兰苷粗提物；

(4)以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5∶3-4∶3-4∶3)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，将步骤(3)中的水晶兰苷粗提取用下相溶解，进行高速逆流色谱分离，收集富含水晶兰苷的流出液，减压浓缩，真空干燥即得产品。

步骤(1)中提取液浓缩至每ml含生药材3-5g。

步骤(3)中大孔树脂可选AB-8、HPD-450、HPD-300中的一种。

步骤(4)中高速逆流色谱仪转速为700～900r/min，流动相的流速为1.5～3ml/min。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有以下优点：

(1)水浸后超声处理，提取效率高，能耗低；

(2)本发明工艺稳定，操作简单，生产周期短；

(3)大孔树脂可重复利用，高速逆流色谱分离效果好，样品损失少；

(4)经本方法得到的水晶兰苷的纯度在95-99.5％，纯度高，适合制备各种剂型。

为了更好地理解本发明，下面结合本发明的实施例进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。

具体实施方式：

实施例一：

取巴戟天茎10kg，经粉碎，在常压下，加入12倍量(v/w)水60℃下保温浸渍5h后，超声处理40min，合并提取液，减压除去部分溶剂，得浓缩液，浓缩液体积为3300ml，加入0.3％壳聚糖，加乙醇至浓度为85％，静置，过滤，滤液进行高速离心分离，得澄清液，上AB-8大孔树脂柱纯化，依次用30L水和30L50％乙醇溶液洗脱，收集醇洗脱液，蒸干，得到水晶兰苷粗提物，以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5∶3∶4∶3)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，将水晶兰苷粗提取用3000ml下相溶解，将上相用泵以10ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，控制色谱仪转速为750r/min，以流速为2.5ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为150mg，收集富含水晶兰苷的流出液，真空减压浓缩，干燥即得产品18.9g，含量为97.9％。

实施例二：