[发明专利]姜脱病毒培养与脱毒苗繁殖、生根同步化培养方法无效
申请号: | 201110050841.X | 申请日: | 2011-03-03 |
公开(公告)号: | CN102144565A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 高山林;韦坤华 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人: | 张立荣 |
地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 培养 脱毒 繁殖 生根 同步 方法 | ||
1.一种姜脱病毒培养与脱毒苗繁殖、生根同步化培养方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)外植体的选择与消毒:取姜根茎萌发至1-2cm长的嫩芽作为外植体,剥去外层包叶后依次用洗洁精水溶液浸泡5min、自来水冲洗15-30min、0.1%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次,最后用消毒滤纸除去表面水分;其中每升0.1%升汞中加2-3滴吐温-20;
(2)热处理结合茎尖组织培养:将步骤(1)中得到的外植体在60℃下处理15-30 min,置于解剖镜下,剥取0.2-0.3mm的茎尖分生组织,接种到MS培养基中培养60天得到脱病毒苗;培养温度为23-27℃,光照强度为1500lx,光照时间为14-16小时/天;其中MS培养基中含有2.0 mg/L的6-BA、0.2mg/L 的IAA、30g/L的糖和3.4g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8;
(3)繁殖与生根同步化培养:将步骤(2)中得到的脱病毒苗置于MS培养基中培养30天得到试管苗,培养温度为23-27℃,光照强度为1500lx,光照时间为14-16小时/天;其中MS培养基中含有2.5 mg/L的 6-BA、0.4 mg/L 的NAA、0.3 mg/L的ABT、30g/L的糖和3.4 g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8;
(4)炼苗与移栽:将步骤(3)中得到的试管苗取出,洗净根部培养基,分成带2-3个根的单株苗,再放入瓶内,加入水,用瓶盖掩盖瓶口,炼苗2-3天后移栽苗床;所述苗床的营养土重量配比为:珍珠岩: 碱性营养土: 酸性营养土=1: 1: 1,试管苗在苗床生长一个月后移栽大田。
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