[发明专利]一种改性葡聚糖转基因载体及其制备方法与应用有效
申请号: | 201110051515.0 | 申请日: | 2011-03-03 |
公开(公告)号: | CN102181464A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 刘文广;王宏博;杨建海;王玮 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C08B37/02 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王秀奎 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改性 聚糖 转基因 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种改性葡聚糖转基因载体,其特征在于,分子式如下:
R=H或NH2(CH2)n1NH(CH2)n2NH2
其中以葡聚糖分子为主链,取代基R为氢原子或者NH2(CH2)n1NH(CH2)n2NH2,n1为1-5,n2为1-5。
2.根据权利要求1所述的一种改性葡聚糖转基因载体,其特征在于,所述n1为1-3,所述n2为1-3。
3.根据权利要求2所述的一种改性葡聚糖转基因载体,其特征在于,所述n1为3,所述n2为3。
4.一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,按照下述步骤进行:利用三氟乙酸乙酯对小分子修饰剂的伯胺进行保护,然后将葡聚糖、伯胺受到保护的小分子修饰剂和N,N’-羰基二咪唑混合均匀反应,使小分子修饰剂通过仲胺连接到葡聚糖的羟基上,最后对受到保护的伯胺进行脱保护,最终使葡聚糖分子与小分子修饰剂键接,即得到改性葡聚糖转基因载体。
5.根据权利要求4所述的一种一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,所述小分子修饰剂是既有伯胺又有仲胺的小分子,分子式为NH2(CH2)n1NH(CH2)n2NH2,其中n1为1-5,n2为1-5。
6.根据权利要求5所述的一种一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,所述n1为1-3,所述n2为1-3。
7.根据权利要求4所述的一种一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,利用三氟乙酸乙酯对小分子修饰剂的伯胺进行保护时,一般在80~90℃下进行回流反应至少24小时,以保证伯胺的保护效果。
8.根据权利要求4所述的一种一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,将葡聚糖、小分子修饰剂和N,N’-羰基二咪唑混合均匀反应时,一般在60~90℃下反应至少24小时,葡聚糖的用量大于小分子修饰剂,以保证小分子修饰剂能够键接到葡聚糖分子上;同时为保证反应的效率,小分子修饰剂与N,N’-羰基二咪唑的摩尔比是1∶1或者小分子修饰剂稍过量;在反应结束后,采用透析方式进行提纯。
9.根据权利要求4所述的一种一种制备改性葡聚糖转基因载体的方法,其特征在于,采用溶液体积为25%的氨水在温度为60℃下对氨基进行脱保护,然后将产物在70-80℃下悬蒸,并且在去离子水中透析,冻干,即得到改性葡聚糖转基因载体。10.如权利要求1所述的改性葡聚糖转基因载体作为非病毒类转基因载体的应用。
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