[发明专利]一种谷氨酸脱氢酶的突变体酶及其构建方法有效
申请号: | 201110059834.6 | 申请日: | 2011-03-14 |
公开(公告)号: | CN102199578A | 公开(公告)日: | 2011-09-28 |
发明(设计)人: | 朱国萍;潘蔚;宋平;曹正宇;王鹏;王晖;王文才;靳明明 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/10;C12N15/70;C12R1/42;C12R1/19 |
代理公司: | 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 | 代理人: | 谢世红 |
地址: | 241000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 谷氨酸 脱氢酶 突变体 及其 构建 方法 | ||
1.一种谷氨酸脱氢酶的突变体酶,其特征在于:它具有SEQ ID NO:1,所示的氨基酸序列。
2.一种编码权利要求1所述的谷氨酸脱氢酶的突变体酶的基因。
3.权利要求1所述的一种谷氨酸脱氢酶的突变体酶的构建方法,包括以下步骤:从鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)中获得谷氨酸脱氢酶基因,通过突变引物获得了突变的基因片段,将突变基因片段与pET28b质粒连接,构建重组表达质粒pET28b-KA/LG;该重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞,构建用于突变体酶表达的基因工程菌Rosetta(DE3)/pET28b-KA/LG;
所述的166位的突变引物为:
166位anti-sense:5′-GATATCCCCCCCAGGCACGTCG-3′;
166位sense:5′-GATACCGACGTGCCTGGGGGGGATA-3′;
92位突变引物为:
92位anti-sense:5′-GCATACCGCCAAGATAGGGGCCGATAG-3′;
92位sense:5′-TCGGCCCCTATCTTGGCGGTATGCG-3′。
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