[发明专利]一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法

权利要求书

1.一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征如下所述：

(1)摇瓶液体菌种培养

①选用枯草芽孢菌GDGR-1006为保藏菌种，

②将葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、琼脂、水按比例配制成初级菌种培养基装入茄瓶，

③在步骤②所述的初级菌种培养基中接入保藏菌种，静置培养后获得初级菌种，

④将所述的初级菌种放入摇瓶培养基中，在往复式摇床上培养，获得摇瓶液体菌种；

(2)高产率鸟苷发酵液制取

①将葡萄糖液、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、水按比例配制成二级菌种培养基，经蒸汽灭菌一段时间泵入二级种子罐，降温后再接入步骤(1)④所述的摇瓶菌种，并将经压缩、过滤后的无菌空气输入二级种子罐，培养后获得二级菌种，

②将葡萄糖液、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、水按比例配制成发酵培养基，蒸汽灭菌一段时间泵入发酵罐，降温后接入步骤(2)①所述的二级菌种，同时在步骤(2)①的保压、无菌空气输入的条件下，将经蒸汽灭菌、降温后葡萄糖液与苹果酸同时进行连续流加，发酵培养后获得鸟嘌呤核苷发酵液。

2.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征是初级菌种培养基原料的重量百分比为葡萄糖∶磷酸氢二钾∶硫酸镁∶苹果酸∶酵母粉∶琼脂∶水＝1％±0.5％∶0.2％±0.2％∶0.1％±0.1％∶0.1％±0.1％∶2％±2％∶2％±2％∶94.6％±4.9％。

3.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征是摇瓶菌种培养基原料的重量百分比为葡萄糖∶磷酸氢二钾∶硫酸镁∶苹果酸∶酵母粉∶水＝3％±0.5％∶0.2％±0.2％∶0.1％±0.1％∶0.1％±0.1％∶1.5％±1.5％∶95.1％±2.4％。

4.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征是二级菌种培养基原料的重量百分比为葡萄糖∶磷酸氢二钾∶硫酸镁∶苹果酸∶酵母粉∶水＝5％±0.5％∶0.2％±0.2％∶0.1％±0.1％∶0.1％±0.1％∶1.5％±1.5％∶93.1％±2.9％。

5.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征是发酵培养基原料的重量百分比为葡萄糖∶磷酸氢二钾∶硫酸镁∶苹果酸∶酵母粉∶水＝15％±3％∶0.2％±0.2％∶0.1％±0.1％∶0.1％±0.1％∶1.0％±1％∶83.6％±4.4％。

6.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征是采用50～70g/dL葡萄糖液与重量百分比为0.1％±0.02％苹果酸的方式进行连续流加。