[发明专利]利用人工合成的抗菌肽基因培育抗萎病棉花的方法

权利要求书

1.利用人工合成的抗菌肽基因培育抗黄萎病棉花的方法，其特征在于，将人工合成的抗菌肽基因spCEMA整合入陆地棉栽培种，实现抗菌肽基因spCEMA在转基因棉花中组成型表达，提高棉花对黄萎病的抗病能力。

2.　如权利要求1所述利用人工合成的抗菌肽基因培育抗黄萎病棉花的方法，包括如下步骤：

步骤1：将CaMV35S启动子控制抗菌肽基因spCEMA的表达元件可操作地插入植物表达载体p5中，构建植物表达载体p5-spCEMA；

步骤2：将上述植物表达载体转入宿主根癌农杆菌，获得转化体；

步骤3：通过转化体将植物表达载体整合入棉花基因组，然后，经过Km抗性愈伤和胚性愈伤的诱导获得体胚，体胚成苗后获得抗黄萎病的spCEMA转基因棉花植株； 

步骤4：转基因棉花经室内抗病鉴定和筛选获得对黄萎病抗性的提高，基因表达适量的转基因棉花材料。

3.如权利要求1所述利用人工合成的抗菌肽基因培育抗黄萎病棉花的方法，其特征在于，步骤3获得的转基因棉花再经过后代性状分离筛选，获得抗病性状稳定遗传的纯合型转基因棉花。

4.如权利要求3所述利用人工合成的抗菌肽基因培育抗黄萎病棉花的方法，其特征在于，所述抗病性遗传稳定的纯合型转基因棉花经田间抗病鉴定和筛选获得抗黄萎病的转基因棉花新资源。

5.如权利要求1所述利用人工合成的抗菌肽基因培育抗黄萎病棉花的方法，其特征在于，所述步骤1构建植物表达载体p5-spCEMA，是以含有NPTII筛选标记基因和GUS报告基因的植物表达载体p5为基本骨架，将spCEMA基因连接入载体的多克隆位点构建组成型植物表达载体p5-spCEMA。