[发明专利]一种海洋链霉菌及利用其制备星形孢菌素和K-252d的方法有效
申请号: | 201110065140.3 | 申请日: | 2011-03-17 |
公开(公告)号: | CN102181387A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 鞠建华;周俊勇;黄洪波;马俊英;王博;汪中文;田新朋;张偲;张长生 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P17/18;C12P19/28;C12R1/465 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 余炳和 |
地址: | 510301 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 霉菌 利用 制备 星形 菌素 252 方法 | ||
1.海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667,其保藏编号为:CGMCC No.4360。
2.一种制备星形孢菌素和K-252d的方法,其特征在于,星形孢菌素和K-252d是从权利要求1所述的海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667的发酵培养物中制备得到的。
3.根据权利要求2所述的制备星形孢菌素和K-252d的方法,其特征在于,所述的从海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667制备星形孢菌素和K-252d的方法具体包括以下步骤:
(1):制备海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667的发酵培养物,将发酵培养物离心,取上清液;
(2):上清液上大孔吸附树脂柱,先用3倍柱体积的去离子水洗脱,再用体积分数为95%的乙醇水溶液洗脱,体积分数为95%的乙醇水溶液的洗脱液浓缩得浸膏,浸膏经硅胶柱层析,以氯仿-甲醇为洗脱剂从体积比10∶0~8∶2梯度洗脱,收集氯仿-甲醇体积比为96∶4洗脱的馏分A,收集氯仿-甲醇体积比为9∶1洗脱的馏分B,馏分A浓缩后再经正相硅胶柱层析,以乙酸乙酯-石油醚体积比7∶4洗脱,得到化合物星形孢菌素;馏分B经正相硅胶柱层析,以氯仿-甲醇为洗脱剂从体积比10∶0~88∶12梯度洗脱,收集氯仿-甲醇体积比为94∶6~93∶7洗脱的馏分,浓缩再经反相硅胶柱层析,以水-甲醇为洗脱剂从体积比75∶25~0∶100梯度洗脱,收集水-甲醇体积比为3∶7洗脱的馏分,得到K-252d。
4.根据权利要求3所述的制备星形孢菌素和K-252d的方法,其特征在于,所述的制备海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 1667的发酵培养物通过以下方法制备:
将海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667接入种子培养基中,于28℃培养24~48小时,得到种子培养液,将种子培养液按体积比为1∶20~1∶9的比例接入发酵培养基中,于28℃培养144~240小时,得到的海洋链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO1667的发酵培养物;
所述种子培养基每升含有:可溶性淀粉10g,K2HPO4 1g,MgSO4·7H2O 1g,(NH4)2SO4 2g,CaCO3 2g,蛋白胨1g,酵母提取物0.5g,海盐30g,余量为水,pH7.2~7.4;
所述发酵培养基每升含有:大豆粉10g,可溶性淀粉20g,酵母提取物5g,蛋白胨2g,CaCO32g,NaCl 4g,余量为水,pH 7.0~7.4。
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