[发明专利]一种萝卜种质抗黑斑病的快速鉴定方法

权利要求书

1.一种萝卜种质抗黑斑病的快速鉴定方法，其特征在于按以下步骤依次组成：

(1)供试材料准备

供试的黑斑病菌种为萝卜链格孢(Alternaria Groves et Skoloko)，菌种接种前用PDA培养基进行产孢培养备用；供试的萝卜品种为春白萝卜、秋白萝卜、耐热红皮和耐热白皮萝卜四种类型萝卜品种；将供试的种子播种在装有灭菌基质的花盆(8cm*8cm)内，出苗后每盆留1-3株。

(2)接种

直接采用孢子悬浮液喷雾接种，接种后将供试植株放入塑料盒内，用保鲜膜保湿48h。每供试材料设置3次重复，每次重复30株苗，以清水为对照，设置1.0×10³、1.0×10⁴、1.0×10⁵、1.0×10⁶pfu/mL四种接种浓度的孢子悬浮液和3-4、5-6、7-8叶期三种苗龄，在约20-25℃条件下诱导发病，置于光照培养室中，接种后第7d、第10d与第14d调查病情指数；

(3)病情指数分级

病情指数分级以叶片为单位，按0-9级标准进行发病程度调查。病情分级标准：0级：无症；1级：接种叶生褐色小点，无退绿斑；3级：接种叶生3mm以下的退绿斑，无霉层；5级：接种叶生3mm以上的退绿斑，有极少霉层，病斑不连成片；7级：接种叶生5mm以上的退绿斑，有较多的霉层，病斑连成片以下；9级：接种叶病斑连成片，大面积枯死，霉层明显。

2.如权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于：所述的光照培养室内温度优化为大约20-25℃。

3.如权利要求1或2所述的鉴定方法，其特征在于：所述的黑斑病孢子悬浮液浓度优选为1.0×10⁵pfu/mL。

4.如权利要求1或2所述的鉴定方法，其特征在于：所述的黑斑病孢子悬浮液喷雾接种植株为大约5～6叶期幼苗，大概10天后调查病情。