[发明专利]一种麦白霉素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种麦白霉素的制备方法，尤其涉及一种通过发酵法制备麦白霉素的方法。

背景技术

麦白霉素(Meleumycin，MLM)是我国抗生素工作者相继从四川、广东土壤中分离出的链霉菌(S.mycarofaciens10204及1748)，经发酵提炼所得。麦白霉素对金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌和肺炎球菌中的红霉素敏感菌有较好的抗菌作用，对细小的链球菌和淋病奈瑟氏球菌等其它常见临床致病菌有一定的抗菌活性。

我国虽然已有麦白霉素的生产，但在工业生产中还存在许多问题和不足，突出表现在生产菌的产抗能力不高，产品中非A1物质含量较高，影响了麦白霉素产品质量，国内对其研究大多关注产品质量改善和原材料的替换，如发表在中国矿业大学学报，2003年3月，32(2)，193-196，“玉米粉水解糖作碳源发酵麦白霉素的研究”。中国抗生素杂志，2001年8月，26(4)，301-303，“提高麦白霉素发酵效价及有效A1组份产量的研究”等，通过添加金属离子提高生物发酵水平已在螺旋霉素发酵上取得成功，但在麦白霉素发酵上还未见报道。

现有的麦白霉素的发酵生产只是一些比较常规的发酵生产方式，即：不添加金属离子的生产工艺，发酵工艺为将斜面接种于一级种子培养基，28℃培养28-36h，按5-8％接种量接种二级种子培养基，28℃培养12-16h；按8-10％接种量接种于发酵罐中进行发酵，28℃培养40-45h；所存在的突出问题是发酵单位较低，并且费时费力，往往达不到生产化的要求。

发明内容

为解决上述问题，本发明的目的是提供一种麦白霉素的制备方法，从而有效提高产量，降低生产成本。

为实现上述目的，本发明所提供的一种麦白霉素的制备方法，包括在发酵培养基中对菌种进行发酵以获得麦白霉素的步骤，其特征在于，在发酵过程中向发酵培养基中添加锌离子溶液，使得发酵培养基中的锌离子浓度为5-15mM。优选的锌离子溶液为七水硫酸锌的水溶液。

本申请发明人惊奇地发现，在所述发酵工艺过程中，如果加入锌离子，发酵单位能够提高12.5％。

优选的，在发酵开始后的0-12h过程中，向发酵培养基中添加锌离子溶液，然后再继续进行发酵。申请人发现，在发酵初期加入锌离子溶液，效果较好。

更优选的，在发酵开始后的10h时，向发酵培养基中添加锌离子溶液，然后再继续进行发酵。其它发酵的条件本领域技术人员可以根据常规发酵方法进行选择。例如，可接种于发酵装置中，28℃培养40-48小时。发酵装置例如优选为50m³不锈钢罐，转速的优选范围80-140转/分，罐压的优选范围0.01-0.05Mpa，风量的优选范围1∶(0.8-1.2)VVM或1500-3000M³/h。

本发明的麦白霉素的制备方法中，通常还包括在发酵之前将种子在种子培养基中进行培养的步骤，然后再将培养后获得的种子液接种于发酵培养基中，进行发酵。优选的，先将菌种接种于一级种子培养基中，在温度28℃下培养28-36小时，再按5-8％的接种量接种于二级种子培养基中，28℃下培养12-16小时，然后再将培养后获得的种子液按8-10％接种量接种于发酵培养基中，进行发酵。

本发明的麦白霉素的制备方法中，通常还包括在发酵之后对发酵液进行分离提纯的步骤。例如对发酵液进行过滤、萃取、结晶、干燥，以获得麦白霉素成品。

根据本发明的一个具体实施方式，可以先将斜面(即种子)接种于一级种子培养基，28℃培养28-36h，再按5-8％接种量接种二级种子培养基，28℃培养12-16h；按8-10％接种量接种于发酵摇瓶中，260r/min，28℃旋转式摇床进行发酵，培养48h；或按8-10％接种量接种于发酵罐中进行发酵，28℃培养40-45h；本发明是在发酵过程中添加锌离子的水溶液，当上述的发酵进行到0-12小时时，将已灭菌锌离子的水溶液添加到发酵摇瓶或发酵罐中，使得发酵摇瓶或发酵罐中锌离子浓度为5-15mM。将所得发酵液按常规处理，过滤、萃取、结晶、干燥，即得麦白霉素成品。

本发明中，发酵培养基可以按照常规配制方法进行配制。例如，发酵培养基可以为(按重量百分比计)：淀粉1.5-3.0％、葡萄糖1.5-3.0％、黄豆饼粉2-5％、酵母粉0.1-0.3％、硫酸镁0.05-0.2％、磷酸二氢钾0.05-0.2％、碳酸钙0.1-0.35％，余量为水。

本发明与现有技术相比，具有如下特点：

(1)发酵水平高，已明显超过原工艺的水平。

(2)对组分没有影响。