[发明专利]赖氨酸的发酵制备

权利要求书

1.L-赖氨酸的发酵方法，其包括：

(1)将编码二氢吡啶二羧酸合成酶变体的多核苷酸导入产L-赖氨酸的菌，从而使所获得的菌表达所述二氢吡啶二羧酸合成酶变体，其中所述二氢吡啶二羧酸合成酶变体在野生型二氢吡啶二羧酸合成酶的M13、V60或A83的位置上被其他天然氨基酸替换；和

(2)在发酵条件下培养步骤(1)获得的菌。

2.权利要求1所述的发酵方法，其中所述二氢吡啶二羧酸合成酶变体在野生型二氢吡啶二羧酸合成酶的M13、V60和A83的位置上被其他天然氨基酸替换，优选替换选自M13K、V60L和A83G。

3.权利要求2所述的发酵方法，其中所述二氢吡啶二羧酸合成酶变体的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示，优选其由如SEQ ID No：2所示的核苷酸序列编码。

4.权利要求1所述的发酵方法，其中所述多核苷酸是通过穿梭质粒导入产L-赖氨酸的菌的。

5.权利要求1所述的发酵方法，其中所述菌是棒状杆菌。

6.权利要求5所述的发酵方法，其中所述发酵条件的发酵温度为28-35℃，优选为29-33℃，更优选为30-32℃，如30℃。

7.权利要求2所述的发酵方法，其中所述发酵条件的培养基包含糖，NH₄Cl，CaCl₂，KH₂PO₄，蛋白胨，MgSO₄，FeSO₄，MnSO₄，生物素，和叶酸。

8.L-赖氨酸饲料添加剂的制备方法，其包括：

(1)实施权利要求1-7之任一所述的发酵方法的步骤(2)；和

(2)收集发酵液依次进行膜分离并对滤液进行喷雾干燥；

(3)对步骤(2)喷雾干燥获得的颗粒进行筛分；

(4)将筛分得到的粒径大于等于1.5mm的颗粒破碎，并将其与筛分得到的粒径小于1.5mm的颗粒混合，再次进行喷雾干燥；和

(5)对步骤(4)喷雾干燥获得的颗粒进行筛分，收集粒径小于1.5mm的颗粒。

9.根据权利要求8所述的制备方法得到的L-赖氨酸饲料添加剂。

10.二氢吡啶二羧酸合成酶变体及其编码基因。