[发明专利]一种培育优良食味、抗条纹叶枯病水稻品种的育种方法

权利要求书

1.一种培育优良食味、抗条纹叶枯病水稻品种的育种方法，其特征在于：

1）选用Wx位点上基因型为Wx-bWx-b，条纹叶枯病感病基因型为stv-bⁱstv-bⁱ的江苏高产粳稻品种武粳13为母本♀与具有暗胚乳突变基因和条纹叶枯病抗性基因，暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq，条纹叶枯病抗病基因型为Stv-bⁱStv-bⁱ的日本优质粳稻品种关东194为父本♂杂交配组，其中Wx-mq、stv-bⁱ相对于Wx-b、Stv-bⁱ为隐性遗传；

2）种植F₁、F₂ 、F₃，成熟后全部单株混收；

3）F₄代开始进行水稻暗胚乳突变基因和条纹叶枯病抗性基因的分子标记辅助选择，苗期各单株DNA的提取采用SDS法；

暗胚乳突变基因Wx-mq的分子检测，利用四引物PCR标记引物：

正向外引物Wx-mq-O-F序列为 5'-ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC-3'

反向外引物Wx-mq-O-R序列为 5'-GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA-3'

正向内引物Wx-mq-I-F序列为 5'-GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG-3'

反向内引物Wx-mq-I-R序列为 5'-GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT-3'

扩增水稻品种的基因组DNA并经溴化乙锭染色后观察，选择具有439 bp和292 bp两条特征条带的Wx-mq基因纯合体单株；

条纹叶枯病抗性基因Stv-bⁱ的分子检测，利用SCAR标记引物：

正向引物ST-F序列5'-CGAAAGATGGTTTCTCCACC-3'，

反向引物ST-R序列5'-GACCAAGCAACTAATGACGC-3'，

扩增水稻品种的基因组DNA并经溴化乙锭染色后观察，选择具有727 bp特征条带的含Stv-bⁱ的杂合或纯合体单株；

4）将F₄代中同时含有Wx-mq基因纯合体和Stv-bⁱ基因的纯合体、或同时含有Wx-mq基因纯合体和Stv-bⁱ基因杂合体的单株分别种成F₅小区，利用上述分子标记对条纹叶枯病免疫或高抗的小区继续进行检测，选择所有单株均同时具有暗胚乳突变基因，即具有439 bp和292 bp特征条带以及条纹叶枯病抗性基因，即727 bp特征条带的小区即同时含有Wx-mq和Stv-bⁱ 基因的纯合体，其暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq，条纹叶枯病抗性基因型为Stv-bⁱStv-b^i，，即为获得的培育优良食味、抗条纹叶枯病水稻品种。