[发明专利]纯化贝美前列素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种纯化贝美前列素的方法。更具体而言，涉及一种通过高效液相色谱法结合重结晶法由贝美前列素粗品纯化贝美前列素的方法。

背景技术

贝美前列素为一种合成前列酰胺类药物，能够通过增加房水经小梁网及葡萄膜巩膜两条外流途径而降低眼内压，临床上用于降低对使用其它降眼压药不能耐受或疗效不佳(多次用药后不能达到目标眼内压值)的开角型青光眼或高眼压症患者升高的眼内压。贝美前列素化学名为(Z)-7-[(1R，2R，3R，5S)-3，5-二羟基-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基-1-戊烯基]环戊基]-5-N-乙基庚烯酰胺，化学结构式如下：

贝美前列素的制备通常使用苯丙酸和苯甲酰Corey内酯为起始原料，经14步合成反应得到比马甲酯，再通过胺酯交换反应合成贝美前列素粗品，经纯化得到贝美前列素。

目前，在纯化过程中主要需要去除的是合成反应副产物贝美前列素C₁-酸及5，6-反式异构体。WO 2009/153206中描述了一种通过高效液相色谱法纯化贝美前列素合成产物粗品、尤其是去除其中的15R-贝美前列素和5，6-反式异构体的方法，其产品中15R-贝美前列素和5，6-反式异构体的总含量不高于0.7％，但其并未提出针对杂质C₁-酸的纯化方法。

因此，需要提供一种能够有效去除贝美前列素粗品中的杂质、尤其是C₁-酸及5，6-反式异构体的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有效去除贝美前列素粗品中的杂质、尤其是C₁-酸及5，6-反式异构体，从而纯化贝美前列素的方法。

本发明的方法包括以下步骤：

制料步骤：将贝美前列素粗品用醇类溶剂或氯代烷烃溶剂溶解，再与高效液相色谱反相填料充分混合，然后去除溶剂，制得上样填料；

装柱步骤：将高效液相色谱反相填料加入空的色谱柱中，直至该反相填料上表面距柱顶端为约15-20cm，将色谱柱上端盖装好，从上端盖上的色谱柱入口用泵以不超过3Mpa的压力泵入第一梯度的洗脱液，所用洗脱液的体积为柱体积的4-8倍；

上样步骤：装柱步骤完成后，打开色谱柱上端盖，取出一半体积的反相填料上表面与柱顶端之间的液体，将所述上样填料均匀地加入到反相填料上表面上，再将色谱柱上端盖装好；

洗脱步骤：从色谱柱入口泵入洗脱液，并从色谱柱下端的出口收集出口液体，所述洗脱液为选自醇类、酮类、腈类、四氢呋喃中的一种或多种极性有机溶剂与水的混合物，洗脱梯度：第一梯度的洗脱液极性有机溶剂体积百分比为30-40％，2-4倍柱体积；第二梯度的洗脱液极性有机溶剂体积百分比为45-50％，4-6倍柱体积；第三梯度的洗脱液极性有机溶剂体积百分比为55-60％；用TLC监控出口液体中的贝美前列素，直至无产品洗出即结束洗脱；

重结晶步骤：收集贝美前列素纯度高于90重量％的级分，在35-40℃、100-500mbar条件下减压浓缩直至瓶中物质开始粘附在瓶壁上，将瓶中物质用二氯甲烷和/或氯仿进行重结晶从而获得最终产品。

本发明方法的优点在于不仅能有效去除杂质C₁-酸及5，6-反式异构体，还同时有效去除其他在贝美前列素粗品中通常存在的杂质，因此所得产品纯度较高。经过本发明的方法制得的产品中C₁-酸及5，6-反式异构体总量不高于0.3重量％，贝美前列素纯度高于99重量％。

具体实施方式

本发明的方法包括以下步骤：

制料步骤：将贝美前列素粗品用醇类溶剂或氯代烷烃溶剂溶解，再与高效液相色谱反相填料充分混合，然后去除溶剂，制得上样填料；

装柱步骤：将高效液相色谱反相填料加入空的色谱柱中，直至该反相填料上表面距柱顶端为约15-20cm，将色谱柱上端盖装好，从上端盖上的色谱柱入口用泵以不超过3Mpa的压力泵入第一梯度的洗脱液，所用洗脱液的体积为柱体积的4-8倍；

上样步骤：装柱步骤完成后，打开色谱柱上端盖，取出一半体积的反相填料上表面与柱顶端之间的液体，将所述上样填料均匀地加入到反相填料上表面上，再将色谱柱上端盖装好；