[发明专利]心肌肌钙蛋白半定量检测试纸及制备方法

权利要求书

1.一种心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，主要由样品垫，结合垫，吸水垫，底板，硝酸纤维膜五部分组成，其特征在于：所述硝酸纤维膜上分别划有两条平行的抗体捕获线，靠近结合垫的一条含有经过确定了浓度的第一抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体，作为检测线，另一条含有经确定了浓度的羊抗兔IgG抗体，作为标准浓度显色对照线，两条线相距4--7mm；所述结合垫喷有胶体金或彩色乳胶标记的第二抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG两种物质。

2. 根据权利要求1所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，其特征在于，所述硝酸纤维膜与上部的吸水垫，硝酸纤维膜与下端的结合垫，结合垫与下部的样品垫之间分别部分重叠交接，所述重叠宽度为1-4mm。

3. 根据权利要求1所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，其特征在于，所用的胶体金或彩色乳胶标记的第二抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在20nm—120nm之间。

4.根据权利要求1-3之一所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，其特征在于，分别调整所述羊抗兔IgG抗体、抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体、金标心肌肌钙蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG的浓度，在检测样品时，当样品中的心肌肌钙蛋白I激素浓度为2ng/ml时，检测线与标准浓度显色对照线的红颜色深浅相同；当样品中的心肌肌钙蛋白I激素浓度低于2ng /ml时，检测线的红色浅于标准浓度显色对照线的红色；当样品中心肌肌钙蛋白I激素浓度高于2ng /ml时，检测线的红色深于标准浓度显色对照线的红色。

5.一种与权利要求4所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸配合使用的比色卡，该比色卡中含有多种红色梯度的红色块，每种深浅的红色块，对应用心肌肌钙蛋白I半定量检测试纸检测不同浓度心肌肌钙蛋白I抗原检测所显示的红色；通过对照比色卡，可以半定量确定检测样品中的心肌肌钙蛋白I的浓度。

6. 一种根据权利要求5所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

选择两株抗心肌肌钙蛋白I鼠源性特异单克隆抗体，即抗心肌肌钙蛋白I单抗1和抗心肌肌钙蛋白I单抗2；

选择抗心肌肌钙蛋白I单抗1作为胶体金标记抗体，使用柠檬酸钠还原法制备为20nm~120nm大小的纳米金颗粒，10000RPM/MIN离心10分钟，制备为储备液，将胶体金标记单抗，并加入聚乙二醇PEG，牛血清白蛋白BSA做稳定剂；

将标记好的金标抗体1，喷聚酯膜或玻璃纤维纸，低温干燥，制得金标结合垫；

将玻璃纤维膜浸泡在磷酸盐缓冲液PBS加表面活性剂的溶液中5分钟,再捞出30度左右烘干，制得样品垫；

将2cm宽的硝酸纤维膜粘在PVC片材中间位置，并定量喷涂抗心肌肌钙蛋白I单抗2和定量的羊抗兔抗体两条相距5mm的1mm宽的条带，低温干燥10小时；

裁剪一定宽度的吸水纸，黏贴在PVC片材上硝酸纤维素膜的上部，并交叠硝酸纤维膜1-3mm；

将金标结合垫裁剪成5mm-13mm左右的条带，黏贴在PVC片材上硝酸纤维膜的下部，交叠硝酸纤维膜1-3mm；

将样品垫裁剪成25mm-30mm宽的条带，再黏贴在金标结合垫的下部，交接金标结合垫3mm-5mm；

再用40mm左右的带MAX线的不干胶，粘在金标结合垫和样品垫上；

用切割机将上面制得的大板，切成2.5mm-6mm的条带，即制备成了所述心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，然后用铝箔袋密封干燥备用。