[发明专利]心肌肌钙蛋白半定量检测试纸及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种心肌肌钙蛋白半定量检测试纸。

背景技术

心脑血管疾病是危害人类生命和健康的第一杀手，发病趋势也在逐年上升，美国急诊部门就有4.5亿急性心肌梗塞（AMI）病人，有4亿病人被确诊为急性心肌梗塞，其中2-3%的人真正有AMI，并且由于AMI的症状的多样性，合并症躲在临床存在着相当大的误诊和漏诊，有些心肌损伤因为不典型而被医生和患者忽视，而没有及时救治，出现很多的生命危险。急性心肌梗死发病急，死亡率高，AMI的早期诊断和及时救治对降低AMI死亡率非常重要。

肌钙蛋白是由肌钙蛋白I,T,C三种亚基组成，在肌肉运动中起重要调节作用。当心肌受到损失后，心肌肌钙蛋白复合物释放到血液中，在三种亚基中，肌钙蛋白I（ cTnI）是唯一存在心肌细胞中，迄今为止诊断AMI灵敏度和特异性最高的血清生化指标，被广泛研究作为心肌损伤的确定性标志物，文献表面，正常人血液中的cTnI水平在0.5ng/ml以下，发生心肌梗死后会在4-6小时内上升，所以 0~4ng/ml 的cTnI 浓度的定量对知道医生用药，和病人就诊非常重要。

心肌肌钙蛋白I常规检测方法有放射性免疫法，高效液相色谱法，电化学分析法，蛋白分析仪，ELISA诊断试剂盒和免疫层析试纸条等，这些方法有的存在放射性污染，需要专业大型仪器，耗时长，需要专业人员，不能定量等缺点。在临床上广泛应用具有一定局限，不易广泛推广，也不适合家庭使用。国内现有类似的心肌肌钙蛋白检测方法的相关专利，申请号200310119332.3、名称为“人体心肌肌钙蛋白I的快速测定的方法”的专利，它提供的一种快速测定心肌肌钙蛋白I的方法，但是该方法的步骤繁琐，而且还需要专业设备才能测定含量。申请号CN201020185781.3 的专利虽能定量，但是制备过程繁杂。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服当前胶体金免疫层析试纸条在实际推广使用中只能定性不能定量检测的不足，提供一种不要特定的仪器和专业设备，就能快速评定检测结果，并对检测结果进行半定量水平的测定，同时提供该试纸的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的一种心肌肌钙蛋白半定量检测试纸，主要由样品垫，结合垫，吸水垫，底板，硝酸纤维膜五部分组成，其特征在于：所述硝酸纤维膜上分别划有两条平行的抗体捕获线，靠近结合垫的一条含有经过确定了浓度的第一抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体，作为检测线，另一条含有经确定了浓度的羊抗兔IgG抗体，作为标准浓度显色对照线，两条线相距4--7mm；所述结合垫喷有胶体金或彩色乳胶标记的第二抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG两种物质。

优选的，所述硝酸纤维膜与上部的吸水垫，硝酸纤维膜与下端的结合垫，结合垫与下部的样品垫之间分别部分重叠交接，所述重叠宽度为1-4mm。

所用的胶体金或彩色乳胶标记的第二抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在20nm—120nm之间。

进一步优选的，分别调整所述羊抗兔IgG抗体、抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体、金标心肌肌钙蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG的浓度，在检测样品时，当样品中的心肌肌钙蛋白I激素浓度为2ng/ml时，检测线与标准浓度显色对照线的红颜色深浅相同；当样品中的心肌肌钙蛋白I激素浓度低于2ng /ml时，检测线的红色浅于标准浓度显色对照线的红色；当样品中心肌肌钙蛋白I激素浓度高于2ng /ml时，检测线的红色深于标准浓度显色对照线的红色。

一种与权利要求4所述的心肌肌钙蛋白半定量检测试纸配合使用的比色卡，该比色卡中含有多种红色梯度的红色块，每种深浅的红色块，对应用心肌肌钙蛋白I半定量检测试纸检测不同浓度心肌肌钙蛋白I抗原检测所显示的红色；通过对照比色卡，可以半定量确定检测样品中的心肌肌钙蛋白I的浓度。