[发明专利]一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌。

背景技术

紫色杆菌素(violacein)、脱氧紫色杆菌素是微生物自身产生的一种次级代谢产物，属于吲哚衍生物，由两个色氨酸分子氧化缩合而成。自从19世纪末紫色杆菌素被发现以来，人们对其生物功能进行了大量的探索，因其具有广谱抗菌性，抗原生动物活性，抗病毒性，抗肿瘤细胞活性以及独特的蓝紫色着色能力等功能特性和在医药、卫生、食品、印染等领域潜在的应用前景而受到越来越多的关注。

甲基扭曲杆菌是一类能够利用甲醇等一碳化合物作为唯一碳源和能源的微生物，它们在自然界分布广泛。研究表明，甲基扭曲杆菌能够直接利用一碳化合物，将其转化成自身代谢的一碳单位，并为生物体提供能源和碳骨架，这作为一种新的代谢模式对于研究其工业应用具有重要意义。同时通过流加培养的方式，已经能够实现甲基扭曲杆菌高密度的连续培养，这也为进一步利用甲基扭曲杆菌独特的代谢途径实现高附加值产品的生产提供了广泛的前景。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种重组甲基扭曲杆菌。

本发明所提供的重组甲基扭曲杆菌，是将紫色杆菌素生物合成相关基因簇导入宿主甲基扭曲杆菌中得到的。

上述重组甲基扭曲杆菌中，所述紫色杆菌素生物合成相关基因簇是通过载体pCM110导入的。

上述任一所述重组甲基扭曲杆菌中，所述宿主甲基扭曲杆菌为甲基扭曲杆菌(Methylobacterium extorquens)，具体为甲基扭曲杆菌(Methylobacteriumextorquens)AM1 ATCC 14718。

上述任一所述重组甲基扭曲杆菌中，所述紫色杆菌素生物合成相关基因簇为核苷酸序列如序列表中序列1所示的DNA分子。

其保藏号为CGMCC No.4704的重组甲基扭曲杆菌也属于本发明的保护范围，该菌株的分类命名为甲基扭曲杆菌(Methylobacterium extorquens)，菌株名称为AM1-pCM110vio。

本发明的另一个目的是提供一种制备紫色杆菌素的方法。

本发明所提供的制备紫色杆菌素的方法，包括如下步骤：发酵培养上述任一所述重组甲基扭曲杆菌(Methylobacterium extorquens)，得到紫色杆菌素。

上述过程中，所述发酵培养中，所用的发酵培养基由Na₂HPO₄·12H₂O、(NH₄)₂SO₄、K₂HPO₄·3H₂O、MgSO₄·7H₂O、CaCl₂·H₂O、Na₂MoO₄、ZnSO₄·7H₂O、H₃BO₃、MnSO₄·H₂O、CoCl₂·6H₂O、FeSO₄·7H₂O、CuSO₄·5H₂O、甲醇、色氨酸、四环素和水组成；