[发明专利]一种人血管eNOS基因启动子改构体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种人血管eNOS基因启动子改构体，其特征在于其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.权利要求1所述的人血管eNOS基因启动子改构体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）根据eNOS基因启动子序列设计一对5’端相连方向相反的引物，所述eNOS基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述引物序列如SEQ ID NO:3~4所示；

（2）通过PCR进行eNOS基因启动子的插入序列突变，所述PCR的反应体系如下：

模板1ng/μL                  5μL

dNTPs各2.5mmol/L            2μL

引物各20 μmol/L             1μL

10×缓冲液                    2.5μL

聚合酶5U/μL                 0.1μL

灭菌三蒸水                    13.5μL；

所述PCR的反应程序为：95℃ 5min，（94℃ 45s，55℃ 45s，72℃ 5min）30个循环，72℃ 10min，4℃ 24h；

    经过上述步骤，得到人血管eNOS基因启动子改构体。

3.权利要求1所述人血管eNOS基因启动子改构体在制备治疗血管功能障碍相关性疾病的药物中的应用。