[发明专利]基于脂质体包埋多巴胺的电化学免疫检测方法

权利要求书

1.一种电化学免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：制备包埋多巴胺的小单层脂质体与待检蛋白抗体共耦合物；

步骤2：向固载了所述待检蛋白抗体的微孔板中加入含有不同浓度待检蛋白的标准品充分结合，除去非特异性结合位点，向微孔板中加入所述包埋多巴胺的小单层脂质体与待检蛋白抗体共耦合物充分结合，加入表面活性剂在室温下破乳，制得检测溶液；从微孔板中取所述检测溶液，转移到电化学测试池中，采用线性扫描伏安法，进行电化学发光测试，以标准品中待检蛋白的浓度和相应的电化学峰峰电流绘制标准曲线；

步骤3：向固载了待检蛋白抗体的微孔板中加入待检样品温育，如步骤2进行电化学发光测试，测得待测样品的电化学峰峰电流强度，从标准曲线上读取对应的待检蛋白的浓度。

2.如权利要求1所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，以多壁碳纳米管修饰的玻碳电极为工作电极。

3.如权利要求2所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述多壁碳纳米管修饰的玻碳电极的制备方法为，玻碳电极经Al₂O₃糊抛光后超声洗涤，制得处理后玻碳电极，用浓硝酸-浓硫酸混合溶液处理多壁碳纳米管，分散于DMF溶液中，超声处理，制得多壁碳纳米管溶液，将所述多壁碳纳米管溶液滴加在所述处理后玻碳电极表面，制得所述多壁碳纳米管修饰玻碳电极。

4.如权利要求1所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述表面活性剂为TritonX-100。

5.如权利要求1所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述线性扫描伏安法扫描范围为-0.2～0.8V，扫速为50mV/s。

6.如权利要求1至5任一项所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述待检蛋白为肿瘤标志蛋白。

7.如权利要求6所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述肿瘤标志蛋白包括胃泌素前体释放肽、神经元特异性烯醇化酶、CYFRA21-1、AFP、APT、CEA、CA242、CA125、CA199、CA153、CA724、CA50、f-PSA、t-PSA、Freeβ-hCG、SCCA、β2-MG。

8.如权利要求7所述的电化学免疫检测方法，其特征在于，所述待检蛋白为胃泌素前体释放肽。