[发明专利]用于检测Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶基因的组合物和试剂盒

权利要求书

1.用于检测I型新德里金属β-内酰胺酶基因的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下序列：

1)长度为10-19个核苷酸的用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因的第一引物，该引物的序列包括：

a)SEQ ID No：1所示的序列，

b)SEQ ID No：1所示的序列的至少10个核苷酸连续的片段，或者

c)与a)或b)具有至多5个核苷酸差异的序列；

2)长度为10-18个核苷酸的用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因的第二引物，该引物的序列包括：

a)SEQ ID No：2所示的序列，

b)SEQ ID No：2所示的序列的至少10个核苷酸连续的片段，或者

c)与a)或b)具有至多5个核苷酸差异的序列；

3)长度为10-24个核苷酸的与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列包括：

a)SEQ ID No：3所示的序列或其互补序列，或者

b)SEQ ID No：3所示的序列的至少10个核苷酸连续的片段，

c)SEQ ID No：3所示序列的互补序列的至少10个核苷酸连续的片段，

或者d)与a)或b)或c)具有至多5个核苷酸差异的序列；

其中，3)所述的探针在5’端带有互不相同的荧光报告基团，并且在除5′端外的任意一个位置上带有荧光淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下序列：

1)长度为15-19个核苷酸的用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因的第一引物，该引物的序列包括：

a)SEQ ID No：1所示的序列，

b)SEQ ID No：1所示的序列的至少15个核苷酸连续的片段，或者

c)与a)或b)具有至多2个核苷酸差异的序列；

2)长度为15-18个核苷酸的用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因的第二引物，该引物的序列包括：

a)SEQ ID No：2所示的序列，

b)SEQ ID No：2所示的序列的至少15个核苷酸连续的片段，或者

c)与a)或b)具有至多2个核苷酸差异的序列；

3)长度为15-24个核苷酸的与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列包括：

a)SEQ ID No：3所示的序列或其互补序列，或者

b)SEQ ID No：3所示的序列的至少15个核苷酸连续的片段，

c)SEQ ID No：3所示序列的互补序列的至少15个核苷酸连续的片段，

或者d)与a)或b)或c)具有至多2个核苷酸差异的序列；

其中，3)所述的探针在5’端带有互不相同的荧光报告基团，并且在除5′端外的任意一个位置上带有荧光淬灭基团。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物由以下序列组成：

1)用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因第一引物，该引物的序列为如SEQ ID No：1所示的序列；

2)用于PCR扩增I型新德里金属β-内酰胺酶基因第二引物，该引物的序列为如SEQ ID No：2所示的序列；

3)与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为如SEQ ID No：3所示的序列或其互补序列；

其中，3)所述的探针在5’端带有互不相同的荧光报告基团，并且在除5′端外的任意一个位置上带有荧光淬灭基团。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的组合物，其中，所述荧光报告基团的发射波长小于所述荧光淬灭基团的吸收波长；并且所述荧光报告基团和所述荧光淬灭基团选自由6-羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、6-羧基四甲基罗丹明、磺酰罗丹明、羧基-X-罗丹明、花菁3、花菁3.5、花菁5、花菁5.5、BHQ1、BHQ2、BHQ3、4-(4-二甲基氨基苯偶氮基)苯甲酸、6-羧基-4’，5’-二氯-2’，7’-二甲氧基荧光素琥珀酰亚胺酯和VIC荧光染料所组成的组中。