[发明专利]一种痘苗病毒穿梭载体及其应用

权利要求书

1.一种痘苗病毒穿梭载体，其特征在于，其含有根据痘苗病毒胸苷激酶基因TK及其侧翼序列设计的同源重组臂TKL和TKR，在TKL和TKR之间存在有3个或3个以上的多克隆位点，每个多克隆位点的两端分别连有PE/L启动子和T5nT终止子，所述穿梭载体还含有大肠杆菌复制起始位点pUC ori和抗性筛选标记。

2.根据权利要求1所述的穿梭载体，其特征在于，其出发载体为pBluescipt Sfi。

3.根据权利要求1或2所述的穿梭载体，所述抗性筛选标记为氨苄青霉素抗性基因。

4.根据权利要求3所述的穿梭载体，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

5.权利要求1-4任一项所述穿梭载体的制备方法，其特征在于，包括步骤：

1)根据痘苗病毒胸苷激酶基因TK及其侧翼序列设计并合成同源重组臂TKL和TKR；

2)将合成后的TKL和TKR连接至载体pBluescipt Sfi中，将连接产物命名为pSTK质粒；

3)人工设计并合成痘苗病毒PE/L启动子序列、3个或3个以上MCS多克隆位点以及终止信号序列，组成3个或3个以上表达盒，连接至pSTK质粒中，即得。

6.权利要求1-4任一项所述的痘苗病毒穿梭载体在生物制药中的应用。

7.利用权利要求1-4任一项所述的痘苗病毒穿梭载体制备得到的基因工程活病毒载体疫苗、多肽及亚单位疫苗。