[发明专利]促黄体生成素释放激素衍生物的合成方法

权利要求书

1.促黄体生成素释放激素衍生物的合成方法，所述促黄体生成素释放激素衍生物结构为pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro-R，R=Azgly-NH₂或NHEt，其特征在于包括：

（1）固相合成第一片段pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-OH，其中，His、Ser、Tyr为侧链保护氨基酸；

（2）固相合成第二片段D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro-R-固相支持物，其中D-Ser(tBu)的氨基端为保护基团Fmoc或Boc；

（3）连接所述第一片段和第二片段，并经切肽、纯化，得到所述的促黄体生成素释放激素衍生物pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro-R。

2.根据权利要求1所述的促黄体生成素释放激素衍生物的合成方法，其特征在于：（1）由以下步骤组成：

（a1）提供一树脂作为固相支持物；

（b1）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Tyr(tBu)-OH，并将其连接到（a1）所述的固相支持物上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（c1）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Ser(tBu) -OH，并将其连接到（b1）的固相支持物上的Tyr(tBu)上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（d1）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Trp-OH，并将其连接到（c1）的固相支持物上的Ser(tBu)上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（e1）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的His(trt)-OH，并将其连接到（d1）的固相支持物上的Trp上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（f1）用一活化试剂活化pGlu-OH，并将其连接到（e1）的固相支持物上的His(trt)上；

（g1）将（f1）的固相支持物加入一切肽试剂中，使得其上的多肽从（a1）的固相支持物上脱离，且使得Tyr(tBu)、Ser(tBu)、His(trt)上的侧链保护基团被脱去，从而得到所述的第一片段pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-OH。

3.根据权利要求2所述的促黄体生成素释放激素衍生物的合成方法，其特征在于：（2）由以下步骤组成：

（a2）提供匹配偶联所述末端为R基团的树脂作为固相支持物；

（b2）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Pro-OH，并将其连接到（a2）所述的固相支持物上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（c2）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Arg -OH，并将其连接到（b2）的固相支持物上的Pro上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（d2）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的Leu-OH，并将其连接到（c2）的固相支持物上的Arg上，接着用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc；

（e2）用一活化试剂活化氨基端为保护基团Fmoc或Boc的D-Ser(tBu)-OH，并将其连接到（d2）的固相支持物上的Leu上，即得到所述的第二片段D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro-R-固相支持物。

4.根据权利要求1或2或3所述的促黄体生成素释放激素衍生物的合成方法，其特征在于：（3）由以下步骤组成：

（a3）用一脱保护试剂脱去保护基团Fmoc或Boc，用一活化试剂活化所述第一片段，并将其连接到脱去保护基团的第二片段固相支持物上；

（b3）将上述（a3）中的固相支持物加入一切肽试剂中，使得其上的多肽从上述（a3）得到的固相支持物上脱离，从而得到所述的促黄体生成素释放激素衍生物；

（c3）将上述（b3）的得到的促黄体生成素释放激素衍生物利用HPLC进行纯化。