[发明专利]一种含猪胰脂肪酶的介孔生物材料及其制备方法

权利要求书

1.一种含猪胰脂肪酶的介孔生物材料，其特征在于所述的介孔生物材料为在有机改性的二氧化硅介孔材料的孔道内固定猪胰脂肪酶的介孔生物材料；所述的含猪胰脂肪酶的介孔生物材料的孔径为3-8nm，比表面积为130-290m²/g，猪胰脂肪酶的酶活为130-510u/g，酶活提高比率为1.5-6.0。

2.一种制备如权利要求1所述的含猪胰脂肪酶的介孔生物材料的方法，具体步骤如下：

A)将非离子表面活性剂溶于盐酸的水溶液中，控制溶液的pH为0.1～1，水浴搅拌至澄清，获得澄清溶液，保持温度在35～50℃；

B)在上述步骤A)所得溶液中加入与非离子表面活性剂摩尔比为25～60∶1无机硅源，并且继续搅拌1～3小时；

C)向步骤B)所得溶液体系中逐滴加入有机硅烷化试剂，水浴下保持温度35～50℃，搅拌22～24小时，将无机硅源和有机硅源充分水解；

D)将步骤C)所得到的溶液转入到带有聚四氟乙烯衬套的不锈钢反应釜中，100～120℃下老化22～24h，然后经冷却、过滤、洗涤、干燥，再经过抽提去除表面活性剂得到含有活性基团的介孔氧化硅；

E)将步骤D)得到的具有活性基团的介孔氧化硅材料，加入到猪胰脂肪酶的缓冲溶液中，在离心条件下反应10～20分钟；

F)将步骤E)所得到混合溶液，在温度为5～15℃条件下，离心5～15分钟，滤去清液，自然干燥得到脂肪酶功能化的介孔生物材料。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤A中所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤B中所述的无机硅源为正硅酸乙酯或正硅酸甲酯。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤C中有机硅烷化试剂为分子式为RC_nH_2n-Si(OC_mH_2m+1)3，其中R为氯基、氨基、巯基、乙烯基或环氧基，n为1～4、m为1～4；有机硅烷化试剂的加入量为控制有机硅烷化试剂与无机硅源的摩尔比为1∶1～20。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤E中猪胰脂肪酶的缓冲溶液是为pH范围为5～9的猪胰脂肪酶水溶液；其中猪胰脂肪酶的浓度范围为0.5～5mg/mL。