[发明专利]一种解脂假丝酵母菌株及用其制备长链二元酸的方法

权利要求书

1.解脂假丝酵母(Candida lipolytica)CX-998CCTCC NO：M2011094。

2.用权利要求1所述菌株制备长链二元酸的方法，其特征是，在以C₁₀～C₁₈的正烷烃为基质的培养基中，用权利要求1所述菌株发酵，然后经分离、提取、回收得到与正烷烃基质链相同的长链二元酸。

3.如权利要求2所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，

(1)取权利要求1所述菌株，涂布在麦芽汁固体斜面上，于28℃培养40-44小时；将培养好的菌种刮入装有培养基的三角瓶中，于200rpm的旋转摇床，28℃培养44-48小时，作为发酵罐种子；所述麦芽汁固体斜面为：12Be′糖度的麦芽汁加麦芽汁重量1.8％的琼脂制成的固体斜面；所述培养基为：12Be′糖度的麦芽汁液体培养基；

(2)将步骤(1)培养好的发酵罐种子液接入pH6.0-7.2的含20-25％(v/v)的C₁₀～C₁₈正烷烃和80-75％(v/v)的发酵培养基的混合液中；在pH7.0-8.2下，将混合液在26-32℃，通风发酵转化70-160小时；所述发酵培养基的主要组成成份为：NaAC 8-15g/L，KH₂PO₄ 4-14g/L，NaCl 1.0-1.5g/L，尿素1.0-2.5g/L，蔗糖10-20g/L，维生素C 0.5-1.5g/L；

(3)发酵结束后进行破乳，用过滤膜分离除去菌体和残烃，清液用活性炭脱色，脱色液用H₂SO₄或HCl酸化结晶，压滤、洗涤、吹干、烘干得到产物长链二元酸。

4.如权利要求3所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，所述步骤(2)的发酵条件是：在0-48小时，pH控制在7.0-7.5；在48-120小时，pH控制在7.5-7.8；在120小时以后，pH控制在7.8-8.2。

5.如权利要求3所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，所述种子液的接种量为18-24％。

6.如权利要求3所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，所述发酵培养基的主要组成成份为：NaAC 10-12g/L，KH₂PO₄8-10g/L，NaCl 1.0-1.2g/L，尿素1.2-1.5g/L，蔗糖12-16g/L，维生素C 1.0-1.2g/L。

7.如权利要求6所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，所述发酵培养基的组成为：NaAC 12g/L，KH₂PO₄ 9g/L，NaCl 1.1g/L，酵母膏3g/L，玉米浆2.5g/L，尿素1.2g/L，蔗糖13g/L，维生素C 1g/L，维生素B2 0.02g/L。

8.如权利要求2-7中任意一项所述的制备长链二元酸的方法，其特征是，所述长链二元酸为十一碳二元酸。