[发明专利]一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法

权利要求书

1.一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，首先将大豆分离蛋白与TE缓冲液充分混合制成TE混合液，然后加入混合液二倍体积的异硫氰酸胍裂解液，充分混匀，室温裂解，加入等体积的酚、氯仿/异戊醇抽提蛋白，离心后上清液中加入等体积的氯仿/异戊醇抽提蛋白，离心后上清液加入等体积的氯仿再抽提蛋白，离心，上清液用异丙醇沉淀，离心，沉淀用乙醇洗涤，室温晾干，溶于TE缓冲液中即可基因组DNA的TE溶液。

2.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的TE混合液中大豆分离蛋白为30～80mg，TE缓冲液为120～320μL。

3.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的异硫氰酸胍裂解液其中50～100mM pH 6.0～8.0Tris-HCl；10～100mM pH 8.0EDTA；5M异硫氰酸胍；1.3％Triton X-100。

4.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的室温裂解时间为20～60min。

5.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的酚、氯仿/异戊醇的比例为25∶24∶1。

6.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的氯仿/异戊醇的比例为24∶1。

7.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的洗涤DNA沉淀的乙醇浓度为70～95％。

8.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述异丙醇的沉淀温度为-20～30℃。

9.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述异丙醇的沉淀时间为20～60min。

10.根据权利要求1所述的一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述室温晾干的时间为10～15min。