[发明专利]检测牛肠道病毒和口蹄疫病毒的核苷酸序列和检测试剂盒

权利要求书

1.一组检测牛肠道病毒和口蹄疫病毒的核苷酸序列，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：4，其中序列SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2分别为检测牛肠道病毒的正义引物和反义引物；序列SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4分别为检测口蹄疫病毒的正义引物和反义引物。

2.一种检测牛肠道病毒和口蹄疫的检测试剂盒，其特征在于，由以下组分组成：

1）裂解液；

2）RT-PCR反应液，包括：PCR缓冲液、RT缓冲液、MgCL₂ 、dNTP、牛肠道病毒正义引物、牛肠道病毒反义引物、口蹄疫病毒正义引物、口蹄疫病毒反义引物；

3）反转录酶M-MLV；

4）Taq DNA聚合酶；

5）DEPC水；

6）阴性对照：牛肠道病毒和口蹄疫病毒阴性组织样品，用0.01mol/L pH7.2 PBS缓冲盐水制成20％悬液，70℃作用1小时；

7）牛肠道病毒阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.5所示的核苷酸序列；

8）口蹄疫病毒阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.6所示的核苷酸序列；

其中，牛肠道病毒正义引物为序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，牛肠道病毒反义引物为序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，口蹄疫病毒正义引物为序列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，口蹄疫病毒反义引物为序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的检测牛肠道病毒和口蹄疫病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述RT-PCR反应液包括1×PCR缓冲液、1×RT缓冲液、3mM MgCL₂、0.2mM dNTP、0.2 μM牛肠道病毒正义引物、0.2 μM牛肠道病毒反义引物、0.2 μM口蹄疫病毒正义引物、0.2 μM口蹄疫病毒反义引物。

4.一种检测牛肠道病毒和口蹄疫病毒的检测试剂盒，其特征在于，由以下组分组成：

1）裂解液；

2）RT-PCR反应液，包括：牛肠道病毒正义引物、牛肠道病毒反义引物、口蹄疫病毒正义引物、口蹄疫病毒反义引物；

3）RT-PCR酶颗粒；

4）DEPC水；

5）阴性对照：牛肠道病毒和口蹄疫病毒阴性组织样品，用0.01mol/L pH7.2 PBS缓冲盐水制成20％悬液，70℃作用1小时；

6）牛肠道病毒阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.5所示的核苷酸序列；

7）口蹄疫病毒阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.6所示的核苷酸序列；

其中，牛肠道病毒正义引物为序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，牛肠道病毒反义引物为序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，口蹄疫病毒正义引物为序列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，口蹄疫病毒反义引物为序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的检测牛肠道病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述RT-PCR反应液包括0.2 μM牛肠道病毒正义引物、0.2 μM牛肠道病毒反义引物、0.2 μM口蹄疫病毒正义引物、0.2μM口蹄疫病毒反义引物。