[发明专利]一种从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法

权利要求书

1.一种从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是，包括以下步骤：

（1）原料前处理：将桑叶原料粉碎至10-30目；

（2）酶解：向粉碎后的桑叶原料中加入相当于其重量8-12倍量的水，升温至40-60℃后，加入相当于桑叶原料重量0.1%-0.6%的组合酶，保温酶解6-8h 后，过滤，得酶解原料；

（3）碱醇提取：向酶解原料中加入相当于桑叶原料重量5-8倍量50%-80%的亲水溶剂后，再向其中加入相当于桑叶原料重量0.05%-0.2%的碱性固体物质，搅拌15-45min后，加温至60-80℃回流提取1-3次，每次110-130min，冷却至0-15℃，过滤，得提取液；

（4）酸溶、超滤：将提取液在60-70℃下进行低压浓缩，浓缩至原提取液体积的1/20至1/30，冷却至0-15℃，静置8-12小时，收集沉淀，加入相当于原提取液体积1/30-1/40的体积百分比浓度为0.5-1.5%的酸溶液，搅拌，使其充分溶解后，过滤，将滤液通过超滤膜，得超滤液；

（5）阳离子树脂除杂：将所得超滤液通过阳离子树脂后，使用4-8倍量树脂体积的1%-5%（W/V）氨醇溶液进行洗脱，收集洗脱液；

（6）大孔吸附树脂分离：将步骤（5）得到的洗脱液浓缩至原来体积的1/5-1/10，然后通过大孔吸附树脂，用5-8倍量树脂体积的40%-70%（体积）醇液洗脱，收集洗脱液；

（7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得洗脱液进行浓缩，浓缩至原来体积的1/6-1/8，加入相当于步骤（6）所得洗脱液体积1/6-1/4的甲醇-饱和氨水混合溶剂，调节温度，冷却析晶，得结晶体，干燥，即成。

2.根据权利要求1所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（2）中加入的组合酶由纤维素酶与果胶酶组成，其纤维素酶与果胶酶的重量比为3-5：1。

3.根据权利要求1或2所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（3）中提取的亲水溶剂为C1-C4的醇液；加入的碱性固体物质为氢氧化钠、碳酸钠或者氢氧化钙。

4.根据权利要求1或2所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（4）中加入的酸性溶液为体积百分比浓度为1%的盐酸、硫酸或者磷酸溶液。

5.根据权利要求1或2所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（5），所述阳离子树脂为D151、D110或D113树脂。

6.根据权利要求1或2所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（6），所述大孔吸附树脂为AB-8、XAD-7、XAD-9或者LSD201。  

7.根据权利要求1或2所述的从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是：步骤（7），加入析晶的混合溶剂甲醇-饱和氨水中，甲醇与氨水体积比为5-15：1，析晶温度为-5℃-10℃，重结晶次数为2-3次。