[发明专利]一种筛选中药单体的方法

权利要求书

1.一种筛选中药单体的方法，其特征在于，其包括采用细胞增殖检测、线粒体活性氧生成检测、线粒体膜电位检测、线粒体能量物质ATP和线粒体细胞色素C检测，筛选中药原料中的抗细胞氧化损伤的中药单体。

2.按权利要求1所述的筛选中药单体的方法，其特征在于，所述的中药原料选自丹参或冬虫夏草。

3.按权利要求1所述的筛选中药单体的方法，其特征在于，所述的抗细胞氧化损伤的中药单体为丹酚酸B、原儿茶醛或丹参素钠；或虫草多糖、虫草素或虫草酸。

4.按权利要求1所述的筛选中药单体的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

1)过氧化氢处理肝细胞来源的细胞系建立氧化损伤细胞模型；

2)用MTT比色法检测中药单体对细胞活率的影响；

3)用MTT比色法检测中药单体对氧化损伤模型组细胞活率的影响；

4)用荧光探针、荧光酶标法和流式细胞法检测中药单体处理后氧化损伤模型细胞内线粒体活性氧的生成；

5)用荧光探针、荧光酶标法和流式细胞法检测中药单体处理后氧化损伤模型细胞线粒体膜电位的变化；

6)用虫荧光素酶法检测中药单体处理后模型细胞线粒体ATP的含量；

7)用免疫荧光法和Western blot法分别检测线粒体内外中药单体处理后氧化损伤模型细胞细胞色素C的释放。

5.按权利要求4的方法，其特征在于，所述步骤1)的肝细胞来源的细胞系为H7702细胞。

6.按权利要求4的方法，其特征在于，所述步骤2)中用MTT比色法检测中药单体对H7702细胞活率的影响。

7.按权利要求3所述方法筛选的中药单体在制备抗肝细胞氧化损伤药物中的用途。

8.按权利要求3所述方法筛选的中药单体在制备防、治肝疾病药物中的用途。

9.按权利要求8的用途，其特征在于，所述的肝疾病是脂肪肝、病毒性肝疾病或肝纤维化。