[发明专利]呼吸道病毒检测试剂盒及检测方法有效

专利信息
申请号: 201110089992.6 申请日: 2011-04-11
公开(公告)号: CN102181579A 公开(公告)日: 2011-09-14
发明(设计)人: 顾大勇;黄彤文;李永进;张巍;史蕾;孙秋香;刘春晓;赵纯中;杨燕秋;徐云庆;孙杰;莫秋华;杨泽;庄卫东 申请(专利权)人: 深圳国际旅行卫生保健中心;深圳博尔美生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 何平
地址: 518033 广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 呼吸道 病毒 检测 试剂盒 方法
【说明书】:

【技术领域】

发明涉及分子生物学领域,尤其涉及一种呼吸道病毒检测试剂盒及检测方法。

【背景技术】

常见的呼吸道病毒包括SARS(Severe Acute Respiratory Syndromes,严重急性呼吸综合症)病毒、A、B型流感病毒、副流感病毒I、II、III型、呼吸道融合病毒、腺病毒等,在很多人口密集的公共场所如火车站、广场等需要对上述病毒进行检测,以防止病毒在人群中的快速扩散,避免造成大面积的呼吸道疾病爆发。

然而,传统的呼吸道病毒检测方法检测时间较长且灵敏度较低,无法应对突发性的呼吸道病毒检测。

【发明内容】

基于此,有必要提供一种检测时间较短且灵敏度较高的呼吸道病毒检测试剂盒及采用上述呼吸道病毒检测试剂盒的呼吸道病毒检测方法。

一种呼吸道病毒检测试剂盒,包括选自如下8组引物中的至少一组:

第1组引物用于扩增SARS病毒的如SEQ ID NO.1所示的核酸片段;

第2组引物用于扩增A型流感病毒的如SEQ ID NO.2所示的核酸片段;

第3组引物用于扩增B型流感病毒的如SEQ ID NO.3所示的核酸片段;

第4组引物用于扩增副流感病毒I型的如SEQ ID NO.4所示的核酸片段;

第5组引物用于扩增副流感病毒II型的如SEQ ID NO.5所示的核酸片段;

第6组引物用于扩增副流感病毒III型的如SEQ ID NO.6所示的核酸片段;

第7组引物用于扩增呼吸道融合病毒的如SEQ ID NO.7所示的核酸片段;

第8组引物用于扩增腺病毒的如SEQ ID NO.8所示的核酸片段。

优选的,所述第1组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.9所示,下游引物序列如SEQ ID NO.17所示;

所述第2组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.10所示,下游引物序列如SEQ ID NO.18所示;

所述第3组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.11所示,下游引物序列如SEQID NO.19所示;

所述第4组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.12所示,下游引物序列如SEQ ID NO.20所示;

所述第5组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.13所示,下游引物序列如SEQ ID NO.21所示;

所述第6组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.14所示,下游引物序列如SEQ ID NO.22所示;

所述第7组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.15所示,下游引物序列如SEQ ID NO.23所示;

所述第8组引物:上游引物序列如SEQ ID NO.16所示,下游引物序列如SEQ ID NO.24所示。

优选的,还包括探针,所述探针为如下8个与所述8组引物对应的核酸片段中的至少一个:

第1个探针与如SEQ ID NO.1所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.25所示;

第2个探针与如SEQ ID NO.2所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.26所示;

第3个探针与如SEQ ID NO.3所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.27所示;

第4个探针与如SEQ ID NO.4所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.28所示;

第5个探针与如SEQ ID NO.5所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.29所示;

第6个探针与如SEQ ID NO.6所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.30所示;

第7个探针与如SEQ ID NO.7所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.31所示;

第8个探针与如SEQ ID NO.8所示的核酸片断特异性结合,序列如SEQ IDNO.32所示。

优选的,还包括固相载体,所述固相载体包括基体和固定在所述基体上的附着层,所述探针固定在所述附着层上。

优选的,所述探针的5′端连接有15个胸腺嘧啶(T)。

优选的,还包括阳性质控探针以及与所述阳性质控探针互补的阳性探针。

所述阳性质控探针序列如SEQ ID NO.33所示。

所述阳性探针的序列如SEQ ID NO.34所示。

一种呼吸道病毒的检测方法,包括下述步骤:

步骤一、提取待测样品中的核酸;

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