[发明专利]铬离子抗原及其制备方法与应用无效
| 申请号： | 201110090978.8 | 申请日： | 2011-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN102190723A | 公开（公告）日： | 2011-09-21 |
| 发明（设计）人： | 王保民;孙硕;赵洪伟;南铁贵;高巍;谭桂玉;王敏;曹振;何丽珊;张炜;李召虎 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 离子 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种制备铬离子抗原的方法，包括如下步骤：
(1)将螯合剂进行重氮化反应，得到重氮化螯合剂；
(2)将所述步骤(1)得到的重氮化的螯合剂与载体蛋白进行偶联反应，得到偶联产物；
(3)将所述步骤(2)得到的偶联产物与铬离子进行络合反应，得到络合物，即得到铬离子抗原。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中所述重氮化反应的方法包括以下步骤：
将所述螯合剂溶于酸的水溶液中，得到溶液I；再向所述溶液I中加入亚硝酸盐水溶液，得到溶液II；将所述溶液II在温度为0℃-5℃或0℃或4℃或5℃、避光和反应时间为15min的条件下进行反应，即得到所述重氮化螯合剂。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
所述步骤(2)中所述载体蛋白与所述重氮化螯合剂的投料摩尔比为1∶(5-25)或1∶10或1∶5或1∶25；
所述偶联反应是在温度为4℃-10℃或4℃或7℃或10℃和反应时间为4h-24h或12h或4h或24h的条件下进行；
所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白或人血清白蛋白或血蓝蛋白。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
所述步骤(3)中所述偶联产物与所述铬离子的投料摩尔比为1∶(1-10)或1∶3或1∶1或1∶10；
所述络合反应是在温度为4℃-25℃或25℃或4℃或15℃、pH值为7.0-8.0或7.0或7.5或8.0和反应时间为4h-24h或12h或4h或24h的条件下进行。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：
所述步骤(1)中所述的螯合剂与所述酸的投料摩尔比为1∶(4-10)或1∶10或1∶7或1∶4；
所述螯合剂与所述亚硝酸盐的投料摩尔比为1∶(1-3)或1∶2或1∶1或1∶3；
所述螯合剂为对氨基苯甲基乙二胺四乙酸；
所述的酸为盐酸或硫酸或硝酸或过氯酸或氟硼酸；
所述亚硝酸盐为亚硝酸钠。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：
所述步骤(2)中所述偶联反应还包括将所述偶联产物进行透析，得到纯化的偶联产物的步骤；
所述进行偶联反应前，还包括将所述载体蛋白溶解于碳酸盐缓冲液中的步骤。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：
所述步骤(3)中，还包括将所述络合物进行透析的步骤。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法制备得到的铬离子抗原。
9.由权利要求8所述的铬离子抗原制备得到的抗体。
10.权利要求8所述的铬离子抗原和/或权利要求9所述的抗体在检测铬离子中的应用。
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