[发明专利]小麦TaTOC1基因及其克隆方法和应用无效
| 申请号： | 201110093145.7 | 申请日： | 2011-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN102220347A | 公开（公告）日： | 2011-10-19 |
| 发明（设计）人： | 张宪省;赵翔宇;陈祥彬;叶兴国;潘衍有 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/10;C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小麦 tatoc1 基因 及其 克隆 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.小麦TaTOC1基因，其特征在于，包括TaTOC1-A、TaTOC1-B、TaTOC1-D，TaTOC1-A核苷酸序列为SEQ ID NO：1；TaTOC1-B核苷酸序列为SEQ ID NO：2；TaTOC1-D核苷酸序列为SEQ ID NO：3。
2.小麦TaTOC1基因的克隆方法，其特征在于，包括以下步骤：1)利用Trizol试剂盒提取总RNA；2)第一条链的合成：取2μg总RNA，加入5×反应缓冲液4μl，10mM脱氧核糖核酸2μl，核糖核酸酶抑制剂0.5μl，引物oligodT1μl，反转录酶2μl，42℃反应60分钟，85℃放置10分钟终止反应，稀释至200μl；3)PCR反应；4)基因克隆：取2μl PCR产物与pMD18-T载体进行连接，操作步骤按pMD18-T Vector说明书进行；然后连接产物转化大肠杆菌DH5α菌株，在表面涂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷和X-gal的含100μg/ml氨苄青霉素的LB平板上生长过夜；挑取白色菌落，在LB液体培养基中培养过夜；5)碱法提取质粒DNA；6)序列测定；7)5′序列的分离。
3.根据权利要求1所述的小麦TaTOC1基因在转基因小麦中的应用。
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