[发明专利]一种植物单拷贝基因的检测方法无效
| 申请号： | 201110094969.6 | 申请日： | 2011-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN102191325A | 公开（公告）日： | 2011-09-21 |
| 发明（设计）人： | 李立家;庞代文;何世斌;黄碧海 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 植物 拷贝 基因 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种植物单拷贝基因的检测方法，其特征在于：制备植物的间期核、中期染色体或染色质纤维；制备量子点偶联的DNA作为探针；按照传统的荧光原位杂交方法，进行植物单拷贝基因的杂交，然后检测；所述探针的制备具体包括如下步骤：
A、根据所要检测的目标基因，设计并合成一对寡核苷酸引物，将其中一个引物的5’端连上5’-NH2-(CH2)6-TTTTTT，并通过氨基和量子点上的羧基进行化学反应，偶联到量子点表面；
B、将偶联了量子点的寡核苷酸引物与另外一个引物，以及含有目的片段的DNA模板一起加入聚合酶链式反应体系中，通过聚合酶链式反应得到量子点偶联的长链DNA分子；
C、通过琼脂糖凝胶电泳分离聚合酶链式反应得到的产物，得到单个量子点偶联的单个长链DNA分子，将其作为探针。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述量子点为水溶性的辛胺修饰的聚丙烯酸的量子点。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：偶联在量子点表面的DNA长200-600bp。
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