[发明专利]灵芝发酵菌丝体均一多糖高效提取工艺

说明书

技术领域

本发明涉及多糖的提取工艺，具体涉及灵芝发酵菌丝体均一多糖高效提取工艺。

背景技术

灵芝是担子菌纲多孔菌科(Polyporaceae)灵芝属(Ganodelma)真菌赤芝G.lucidum·karst和紫芝G.japonicrn L loyd的总称，又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株。灵芝原产于亚洲东部，中国分布最广的在江西，灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍惜药材，具备很高的药用价值，经过科研机构数十年的现代药理学研究证实，灵芝对于增强人体免疫力，调节血糖，控制血压，辅助肿瘤放化疗，保肝护肝，促进睡眠等方面均具有显著疗效。

灵芝的化学成分较为复杂，且因所用菌种、菌种产地、栽培方法、提取工艺、制剂方法不同而各异。灵芝的子实体、菌丝体和孢子中含有多糖类、核苷类、呋喃类衍生物、甾酵类、生物碱类、蛋白质、多肽、氨基酸类、三萜类、倍半萜、有机锗、无机盐等。

灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一，具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗氧化、降血脂与抗衰老作用。

灵芝多糖由三股单糖链构成，其构型与DNA、RNA相似，是一种螺旋状立体构型物，螺旋层之间主要以氢键固定。灵芝多糖在单糖组成、糖苷键构型、分子量、旋光度、溶解度等某些理化性质方面存在显著差异。在已提取到的有200多种灵芝多糖中，大多数是异多糖，即除含有葡萄糖外，还含有半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖等其它单糖；由于来源不同，分子量可从数万到数十万不等，多数伴有分支，部分多糖还含有肽链。大多不溶于高浓度乙醇，而溶于热水。温度过高，会引起灵芝多糖的降解，多糖体中糖苷键易断裂而形成多个糖单体，而糖单体是没有活性的。

传统上，灵芝是通过野外采集或人工栽培获得，但灵芝野生资源缺乏，人工栽培的周期长，占地面积大，又受季节限制，从而影响了灵芝的充分利用。采用灵芝液体发酵培养方法具有周期短、成本低、产量大等优点。但是提取多糖都是采用灵芝发酵液，过滤出灵芝菌丝体，干燥后，在进行热水提取的，发酵过滤液是废弃不用的，或者不分离多糖的，提取效率低，费时费力。此外，采用水煎煮提取乙醇沉淀方法，耗时较长，无法分离出分子量集中的灵芝多糖，提取物以粗多糖为主。影响成品多糖含量和药效。灵芝发酵液及菌丝体中除了含有所需要的大分子多糖外，还含有一系列小分子多糖、培养基中的小分子糊精等，这些物质的存在对产品品质具有一定的影响。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种灵芝发酵菌丝体多糖提取工艺。

本发明主要针对灵芝发酵菌丝体提取有效成分灵芝多糖，在发酵中就进行第一次提取，然后用超滤法分离。节省能源，工时缩短，含量提高，得到分子量集中的多糖，疗效高的。超滤膜过滤法整个过程在密闭系统中进行，无需加热，避免和减轻了热和氧对灵芝多糖营养成分的影响。

本发明提供的灵芝发酵菌丝体多糖提取工艺包括下列步骤：

1)将灵芝发酵液在不分离菌丝体的情况下搅拌煎煮提取。

较佳的，搅拌煎煮提取的方法为，加热至沸腾，保温1.4-1.6小时。搅拌速度优选58-62次/分钟。

进一步的，加热提取直接在发酵罐中进行。

2)将加热提取后的发酵液过滤分离菌丝体；分离后的滤液超滤分离出灵芝多糖；分离后的菌丝体加水磨浆后，浆液加水搅拌煎煮提取，提取液离心取上清液，上清液超滤分离出灵芝多糖。

较佳的，浆液搅拌煎煮提取的方法为，加入菌丝体干重5.8-6.2倍量的水，加热至沸腾，保温1.4-1.6小时。搅拌速度优选58-62次/分钟。

较佳的，超滤所用超滤膜选择能截留分子量大于6000D的超滤膜，如孔径为0.05微米-0.1微米的超滤膜。

可多次循环超滤直至透析液固溶物基本上为0。

3)将从滤液中获得的灵芝多糖和从菌丝体中获得的灵芝多糖合并，浓缩后干燥得到产品。

浓缩可采用真空浓缩，真空度0.07-0.09MPA，温度60-85摄氏度。优选的，控制真空度在0.08-0.09MPa之间、温度65-85℃之间。

干燥方法可为喷雾干燥，进口温度172-180℃，出口温度67-75℃。

进一步的，在步骤3)中浓缩步骤之后，可增加醇沉处理步骤，可进一步提高成品的多糖含量。醇沉可采用常规，如加入浓度为90--95％(体积百分比浓度)的乙醇，三倍量，沉淀后沉淀物加热水调整成比重1.15的浓缩液，喷雾干燥。