[发明专利]D-氨甲酰水解酶的突变体及其制备方法和应用有效

申请号：	201110103271.6	申请日：	2011-04-22
公开（公告）号：	CN102747060A	公开（公告）日：	2012-10-24
发明（设计）人：	姜卫红;蔡渊恒;姜世民;顾阳;杨蕴刘;杨晟	申请（专利权）人：	中国科学院上海生命科学研究院
主分类号：	C12N9/78	分类号：	C12N9/78;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12P13/04
代理公司：	上海专利商标事务所有限公司 31100	代理人：	陈静
地址：	200031 ***	国省代码：	上海;31
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	氨甲酰水解突变体及其制备方法应用
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.一种突变型D-氨甲酰水解酶，其对应于SEQ ID NO：2氨基酸序列的第18位由丙氨酸突变为谷氨酸，第30位酪氨酸突变为天冬氨酸，第34位赖氨酸突变为谷氨酸。

2.如权利要求1所述的突变型D-氨甲酰水解酶，其特征在于，其是：

(a)具有SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的蛋白；或

(b)由(a)所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且保留(a)蛋白活性的由(a)衍生的蛋白；且该蛋白的氨基酸序列中对应于SEQ ID NO：3第18位上的氨基酸为谷氨酸，对应于SEQ ID NO：3第30位上的氨基酸为天冬氨酸，对应于SEQ ID NO：3第34位上的氨基酸为谷氨酸。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸选自下组：

(i)编码权利要求1或2所述的突变型D-氨甲酰水解酶的多核苷酸；或

(ii)与(i)中的多核苷酸互补的多核苷酸。

4.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO：3所示氨基酸序列的突变型D-氨甲酰水解酶。

5.一种载体，其特征在于，它含有权利要求3或4所述的多核苷酸。

6.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求5所述的载体，或基因组中整合有权利要求3或4所述的多核苷酸。

7.一种生产突变型D-氨甲酰水解酶的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)培养权利要求6所述的宿主细胞，获得培养物；和

(2)从培养物中分离突变型D-氨甲酰水解酶。

8.权利要求1所述的突变型D-氨甲酰水解酶的用途，用于生产D-对羟基苯甘氨酸。

9.一种生产D-对羟基苯甘氨酸的方法，其特征在于，所述的方法包括：利用权利要求1所述的突变型D-氨甲酰水解酶水解N-氨甲酰-D-对羟基苯甘氨酸，获得D-对羟基苯甘氨酸。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，培养权利要求6所述的宿主细胞产生突变型D-氨甲酰水解酶，该突变型D-氨甲酰水解酶水解N-氨甲酰-D-对羟基苯甘氨酸，获得D-对羟基苯甘氨酸。