[发明专利]酿酒酵母展示亚油酸异构酶催化合成共轭亚油酸的方法无效
| 申请号： | 201110106809.9 | 申请日： | 2011-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN102206688A | 公开（公告）日： | 2011-10-05 |
| 发明（设计）人： | 何国庆;刘佩;阮晖;周倩 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12P7/64 | 分类号： | C12P7/64;C12N9/90;C12N15/63;C12R1/865 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酿酒 酵母 展示 油酸 异构酶 催化 合成 共轭 方法 | ||
1.一种酿酒酵母展示亚油酸异构酶催化合成共轭亚油酸的方法，包括：
将酿酒酵母展示亚油酸异构酶加入到含有亚油酸的pH6.0-7.0的缓冲液中，振荡反应；
所述的酿酒酵母展示亚油酸异构酶通过如下方法制备：
将携带重组质粒的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)K601，接种到YPG培养基中，诱导培养，离心收集菌体，洗涤，得到酿酒酵母展示亚油酸异构酶；
所述的重组质粒包括原始载体pYES2和插入原始载体pYES2的目的基因，所述目的基因由依次连接的Mfα1信号肽基因、亚油酸异构酶基因、酵母α-凝集素C端锚定区基因组成，所述的Mfα1信号肽基因插入到原始载体pYES2中GAL1启动子的下游。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的亚油酸异构酶基因碱基序列如SEQ ID NO：1所示。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的酵母α-凝集素C端锚定区基因碱基序列如SEQ ID NO：2所示。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的Mfα1信号肽基因碱基序列如SEQ ID NO：3所示。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的缓冲液为磷酸缓冲液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的缓冲液中亚油酸的浓度为3mg/ml。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的振荡反应的温度为28-32℃。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的振荡反应时间为6～80h。
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