[发明专利]干细胞筛选系统、其制备方法及干细胞的筛选方法

权利要求书

1.一种干细胞筛选系统，包括：

固体支持物；

涂布在所述固体支持物上的纤维连接蛋白和牛血清白蛋白。

2.权利要求1所述的干细胞筛选系统的制备方法，包括以下步骤：

将纤维连接蛋白与缓冲溶液混合，得到纤维连接蛋白溶液；

将所述纤维连接蛋白溶液加入到固体支持物中进行孵育，得到涂布有纤维连接蛋白的固体支持物；

向所述涂布有纤维连接蛋白的固体支持物中加入牛血清白蛋白，得到干细胞筛选系统。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述纤维连接蛋白溶液的浓度为5μg/mL～20μg/mL。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述孵育的温度为0℃～5℃，所述孵育的时间为10h以上。

5.一种干细胞的筛选方法，包括以下步骤：

a)提供软骨终板细胞重悬液；

b)将所述软骨终板细胞重悬液加入到权利要求1～5任意一项所述的干细胞筛选系统中进行孵育，得到干细胞。

6.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述步骤b)中，所述软骨终板细胞终浓度为200个细胞/cm²～600个细胞/cm²。

7.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述步骤b)中，所述孵育的温度为35℃～38℃，所述孵育的时间为5min～30min。

8.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述步骤a)具体包括：

a1)用胶原酶将软骨终板进行消化，离心后得到软骨终板细胞团；

a2)用DMEM/F12培养液对所述软骨终板细胞团进行重悬，得到软骨终板细胞重悬液。

9.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，还包括：

对所述干细胞进行扩大培养。

10.根据权利要求9所述的筛选方法，其特征在于，采用含有5wt％～20wt％胎牛血清的DMEM/F12培养液对所述干细胞进行扩大培养。