[发明专利]一种中药杜仲制剂的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物质量控制技术领域，特别涉及一种中药杜仲制剂的指纹图谱检测方法。

背景技术

杜仲为杜仲科植物杜仲（Eucommia ulmoids oliv.）的干燥树皮，始载于《神农本草经》，上品，为我国名贵药材，具有被肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效。多用于高血压症，肾虚腰痛，腰膝无力。因杜仲资源易得，已要为当今药用开发热点，并取得不少成就，如全杜仲胶囊、杜仲颗粒、杜仲平压片、杜仲壮骨丸、杜仲冲剂等。

杜仲制剂作为中成药，其药效不是来自任何单一的活性成分，其药效作用上是多种活性成分共同协作的结果。然而，对于杜仲制剂目前多采用单一指标成分进行质量控制，其质量控制方法不能准确全面反映产品的内在质量，也无法用于生产过程中、以及产品质量的有效控制，更不能保证其临床疗效。因此，人们希望能有一种能全面检测杜仲制剂中有效成分的质量检测方法。

发明内容

本发明的目的是针对上述中药杜仲制剂的质量控制现状，提供一种中药杜仲制剂的质量检测方法，该方法提供一种基于高效液相色谱法的中药杜仲制剂的指纹图谱检测方法，可得到中药杜仲制剂的HPLC（高效液相色谱）指纹图谱，可有效控制中药杜仲制剂的质量及保证其临床疗效。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的。

一种中药杜仲制剂的质量检测方法，其特征在于，包括如下步骤。

（1）对照品溶液的制备。

取绿原酸对照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解，摇匀，制成对照品溶液。

（2）供试品溶液的制备。

取杜仲制剂粉末，置于容量瓶中，加50%甲醇，超声处理，取出放冷，经微孔滤膜滤过即得供试品溶液。

（3）色谱条件。

色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为：4.6mm×250mm，5μm。

流动相：乙腈－0.005%磷酸二氢钾水溶液，磷酸的PH值调至2.0～2.2。

梯度洗脱，洗脱程序为：先采用0.005%磷酸二氢钾水溶液进行洗脱；25min时，采用乙腈－0.005%磷酸二氢钾水溶液进行洗脱，乙腈与0.005%磷酸二氢钾的体积百分比为8%:92%；60min时，采用乙腈－0.005%磷酸二氢钾水溶液进行洗脱，乙腈与0.005%磷酸二氢钾的体积百分比为18%:82%；70min时，采用乙腈－0.005%磷酸二氢钾水溶液进行洗脱，乙腈与0.005%磷酸二氢钾的体积百分比为22%:78%；80min时，采用乙腈－0.005%磷酸二氢钾水溶液进行洗脱，乙腈与0.005%磷酸二氢钾的体积百分比为25%:75%。

流速：1.0ml/min；检测波长：340nm；柱温：20℃。

（4）以绿原酸为参照峰的标准指纹图谱的制定。

吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10批，每批10μL，分别注入高效液相色谱仪中，按高效液相色谱法测定，记录色谱图，依据所得的10批对照品的指纹图谱，制定标准指纹图谱。

所述中药杜仲制剂的标准指纹图谱，各共有峰以绿原酸为参照峰，计算相对保留时间和相对峰面积。

（5）指纹图谱的质量控制。

将中药杜仲制剂的供试品溶液指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，确定相似度。

所述步骤（2）中杜仲制剂粉末与甲醇的质量与体积比为1:8～10；所述超声处理时间为35～45min。

所述步骤（2）中微孔滤膜的孔径为0.45μm。

所述步骤（4）中相对保留时间的计算公式为：相对保留时间=其它各组分峰的保留时间/参照峰的保留时间。

相对峰面积的计算公式为：相对峰面积  =其它各组分峰的峰面积/参照峰的峰面积。

所述参照峰为绿原酸峰。

步骤（4）中所述相对保留时间和相对峰面积分别为。

相对保留时间：1（0.200～0.204），2（0.657～0.673），3（1.000），4（1.026～1.028），5（1.447～1.455），6（1.589～1.613），7（2.059～2.101），8（2.253～2.304），9（2.442～2.506）。

相对峰面积：1（0.064～0.161），2（0.140～0.163）,3（1.000），4（0.248～0.284），5（0.078～0.237），6（0.032～0.132），7（0.0630.122），8（0.107～0.200），9（0.026～0.070）。