[发明专利]快速检测NDM-1基因的专用引物及其应用

权利要求书

1.辅助检测NDM-1蛋白的编码基因的专用引物，由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA、序列表的序列4所示DNA、序列表的序列5所示DNA和序列表的序列6所示DNA组成；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

2.一种辅助检测NDM-1蛋白的编码基因的试剂盒，包括权利要求1所述的专用引物；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

3.权利要求1所述专用引物在制备辅助检测NDM-1蛋白的编码基因的试剂盒中的应用；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

4.权利要求1所述专用引物或权利要求2所述试剂盒在辅助检测NDM-1蛋白的编码基因中的应用；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

5.权利要求1所述专用引物或权利要求2所述试剂盒在辅助鉴定含有NDM-1蛋白的编码基因的生物样本中的应用；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

6.如权利要求1所述的专用引物，如权利要求2所述的试剂盒，或如权利要求3至5中任一所述的应用，其特征在于：所述NDM-1蛋白的编码基因为如下(1)或(2)或(3)或(4)所述的DNA分子：

(1)序列表中序列8所示的DNA分子；

(2)序列表的序列8自5’末端第14至826位核苷酸所示的DNA分子；

(3)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白的DNA分子；

(4)与(1)或(2)限定的DNA序列至少具有90％以上同源性且编码相同功能蛋白的DNA分子。

7.一种辅助鉴定待测生物样本是否含有NDM-1蛋白的编码基因的方法，包括如下步骤：

(1)提取所述待测生物样本的基因组DNA；

(2)以步骤(1)的基因组DNA为模板，用权利要求1所述的专用引物进行环介导恒温扩增；

(3)根据步骤(2)的扩增产物鉴定所述待测生物样本是否含有NDM-1蛋白的编码基因；

所述NDM-1蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列7的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列7衍生的蛋白质。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述NDM-1蛋白的编码基因为如下(1)或(2)或(3)或(4)所述的DNA分子：

(1)序列表中序列8所示的DNA分子；

(2)序列表的序列8自5’末端第14至826位核苷酸所示的DNA分子；

(3)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白的DNA分子；

(4)与(1)或(2)限定的DNA序列至少具有90％以上同源性且编码相同功能蛋白的DNA分子。

9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述环介导恒温扩增的反应程序为：65℃1小时，80℃5分钟。

10.如权利要求7或8或9所述的方法，其特征在于：所述环介导恒温扩增的反应体系中，序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA的浓度均为0.2μmol/L，序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA的浓度均为1.6μmol/L，序列表的序列5所示DNA和序列表的序列6所示DNA的浓度均为0.8μmol/L。