[发明专利]一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用

权利要求书

1.一种酿酒酵母的gshl缺失突变株，其特征在于：酿酒酵母的Δgshl突变株YJL101C(Saccharomyces cerevisiae YJL101C)，CCTCC No：M 2011130。

2.权利要求1所述的一种酿酒酵母的gshl缺失突变株YJL101C的构建方法，其步骤是：

A、引物设计：依据酿酒酵母gshl基因序列设计的引物：

上游引物P1：

GCAGATTTAGTATAGGGCTACATTGTAGGGTGGTTTAGAGTATCGAAAATATACATATAGAAGAATAAACGGATCCCCGGGTTAATTAA；

下游引物P2：

GCTTTTTCAATCACCGTGTCACCCAAATCGATAATGTCAACTTTCTTTCACAACCGAAGTAAAAGGAGTGAATTCGAGCTCGTTTAAAC；

B、PCR扩增：利用上游引物P1和下游引物P2对质粒pFA6a-Kan MX6进行PCR扩增，获得含酿酒酵母gshl基因上下游序列的敲除片段；

C、gshl基因的敲除：通过醋酸锂/PEG的转化方法将PCR扩增得到的敲除片段导入酿酒酵母BY47421菌株细胞，筛选得到酿酒酵母的Δgshl突变株。

3.权利要求1所述的一种酿酒酵母的gshl缺失突变株在提高检测氯化镉重金属对酵母细胞的细胞毒性灵敏度中的应用。