[发明专利]一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法

权利要求书

1.一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其步骤如下：

1)将葡萄皮红用水溶解后上径高比为1∶8～1∶10大孔吸附树脂层析柱，用pH值为2～5的水和/或醇溶液梯度洗脱，洗脱液通过液相检测，收集富含锦葵花素葡萄糖苷的组分，加热减压浓缩，得粗品I；

2)多次大孔吸附树脂柱层析得到的粗品I合并后过质量比为1∶1～1∶3活性炭和硅藻土混合层析柱，用氯仿和/或乙醇溶液洗脱，将洗脱液加热减压浓缩，得粗品II；

3)粗品II用乙醇按1g∶5～15ml的比例溶解后加入80-100目聚酰胺混合搅拌均匀，用旋转蒸发仪浓缩干后得拌样聚酰胺，粗品II与聚酰胺的质量比为0.5～2.0∶1；层析柱中依次加入聚酰胺和拌样聚酰胺，采用干法装柱；干法装柱的径高比为1∶3～1∶8，聚酰胺与拌样聚酰胺的高度比为3～8；用乙醇水溶液梯度洗脱，洗脱液分批收集，通过液相检测结果，合并含量相近的组分，将其减压浓缩后，用上述方法再过3～5次聚酰胺层析柱，得到锦葵花素葡萄糖苷含量为95％的精品；

4)精品通过乙醇-丁酮重反复结晶，得到含量98％以上的锦葵花素葡萄糖苷。

2.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤1)中所述的大孔吸附树脂的型号为D101、D201、Diaion HP-20、NKA-II、HPD100、AB-8、X-5或S8之一。

3.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤1)中所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇之一。

4.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤1)中所述的水和/或醇混合溶剂中醇的体积百分比浓度为0～100％。

5.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤2)中所述的氯仿和乙醇混合溶剂中乙醇的体积百分比浓度为0～100％。

6.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤3)中所述的洗脱剂水和/或醇溶液中醇为甲醇、乙醇或丙醇之一。

7.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤3)中所述的水和/或醇混合溶剂中醇的体积百分比浓度为0～100％。

8.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤4)中所述重结晶时间为6～48h。

9.根据权利要求1所述的一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法，其特征在于：所述步骤4)中所述重结晶时溶剂用量为：样品∶乙醇∶丁酮＝1g∶5ml∶5ml～1g∶5ml∶30ml。