[发明专利]一种快速筛选钙离子通道拮抗剂的方法

权利要求书

1.一种高效筛选钙离子通道拮抗剂的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

1)   制作稳定的带钙离子通道的细胞株；

2)   剂量效应标准曲线的制备：将等量的带钙离子通道的细胞株滴入细胞培养板的各个孔内，再加入经梯度稀释的钙离子通道阻断剂，以此同时加入1μM Bay K, 培养至少24小时后测量细胞的存活率，以细胞存活率对钙离子通道阻断剂Nitrendipine的浓度绘制曲线，得到剂量效应标准曲线；

3)   筛选：将带钙离子通道的细胞株滴入细胞培养板的各个孔内，每个孔内带钙离子通道的细胞株的量与步骤2)中带钙离子通道的细胞株的量的加入量相同，再向孔内加入待筛选化合物，得到的数值与剂量效应标准曲线对照，确定其是否对钙离子通道有阻断作用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1)具体为：通过抗药性的选择可将钙离子通道克隆到HEK或CHO细胞上，得到Cav1.2细胞株。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的质粒为可作哺乳动物细胞表达的质粒。