[发明专利]一株耐高糖、高酒精和高酸酿酒酵母ATCC9763的筛选和应用

说明书

技术领域

 本发明涉及一株耐高糖、高酒精和高酸酿酒酵母ATCC9763的筛选和应用，尤其涉及该酵母在葡萄酒发酵，酸面团发酵，动物饲料生产和基因工程中的应用。

背景技术

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，又称面包酵母或者出芽酵母，是与人类关系最广泛的一种酵母。它不仅应用于面包、馒头、酿酒等领域；在现代分子和细胞生物学中，也被用作真核模式生物，其作用相当于原核的模式生物大肠杆菌。

在葡萄皮、果柄及果梗上，生长有大量天然酵母，当葡萄被破碎、压榨后，酵母进入葡萄汁中，将葡萄汁中所含的糖进行发酵、降解，从而生产出醇美的葡萄酒。本发明采集的农家土制葡萄酒除具有葡萄本身果香外，也具有酵母产生的良好果香与酒香，口味新鲜清爽。

发明内容

本发明的目的是提供一株耐高糖、高酒精和高酸酿酒酵母ATCC9763的筛选和应用，该酿酒酵母具有耐温、耐酒精度、耐酸、耐糖、耐氧，产气能力强，生长快速等特点。

一株耐高糖、高酒精和高酸酿酒酵母ATCC9763的筛选，利用YPD培养基平板计数法和DGGE法分析葡萄酒原液菌群数量和组成并筛出7株菌，结合DGGE分析和测序结果，确定其中的酿酒酵母ATCC9763为葡萄酒中优势菌。

在YPD培养基中分别添加不同浓度的葡萄糖和酒精，24 h后测定其OD₆₀₀值，检测不同浓度糖和酒精对其生长的影响作用。

将YPD培养基调为不同的pH值，24 h后测定其OD₆₀₀值，检测不同pH值对其生长的影响作用。

将培养菌置于不同温度，24 h后测定其OD₆₀₀值，检测不同温度对其生长的影响作用。

将培养菌分别置于需氧和厌氧条件，每隔2 h取样测定其OD₆₀₀值，绘制其生长曲线并比较其在需氧和厌氧条件下OD值的异同。

是酿酒酵母ATCC9763应用于葡萄酒酿制：该酿酒酵母可以在糖浓度0.5-6.5%的环境下大量生长，可以耐受0-29%的酒精度，需/厌氧条件下皆可存活，因此可应用于葡萄酒生产工业。

酿酒酵母ATCC9763应用于酸面团发酵：该酵母可在pH 2.5-8.5下大量生长，耐酸能力强，可抵抗酸面团中乳酸菌产生的酸性物质；生长迅速，22 h内可达到对数稳定期，产CO₂能力强， 可应用于酸面团发酵产业。

酿酒酵母ATCC9763应用于动物饲料生产：该酵母生长迅速，22 h内可达到对数稳定期，可为动物饲料提供较多蛋白质，B族维生素、核酸和矿物质，同时也能产生一些保健功能活性物质；该酵母耐酸能力强，可联合益生菌如乳酸菌一起使用，改善饲料风味，为动物提供益生物质；此外，该酵母需/厌氧条件下皆可存活，为生产用饲料深层发酵提供有利条件。

酿酒酵母ATCC9763可应用为工程菌株：该酵母生长迅速，需/厌氧下皆可高量生长，容易培养，可作为模式生物，研究酵母生物信息学和健全异源基因在酵母中进行功能互补。

本发明应用如下：

1、酿酒酵母ATCC9763应用于葡萄酒酿制：

该酿酒酵母可以在糖浓度0.5-6.5%的环境下大量生长，可以耐受0-29%的酒精度，需/厌氧条件下皆可存活，因此可应用于葡萄酒生产工业。

２、酿酒酵母ATCC9763应用于酸面团发酵： 

该酵母可在pH 2.5-8.5下大量生长，耐酸能力强，可抵抗酸面团中乳酸菌产生的酸性物质；生长迅速，22 h内可达到对数稳定期，产CO₂能力强， 可应用于酸面团发酵产业。

３、酿酒酵母ATCC9763应用于动物饲料生产：

该酵母生长迅速，22 h内可达到对数稳定期，可为动物饲料提供较多蛋白质，B族维生素、核酸和矿物质，同时也能产生一些保健功能活性物质；该酵母耐酸能力强，可联合益生菌如乳酸菌一起使用，改善饲料风味，为动物提供益生物质；此外，该酵母需/厌氧条件下皆可存活，为生产用饲料深层发酵提供有利条件。

4、酿酒酵母ATCC9763可应用为工程菌株：

该酵母生长迅速，需/厌氧下皆可高量生长，容易培养，可作为模式生物，研究酵母生物信息学和健全异源基因在酵母中进行功能互补。

本发明的优点是：来源于农家自制葡萄酒的酿酒酵母ATCC9763，耐温、耐酒精度、耐酸、耐糖、耐氧，产气能力强，生长快速，可应用于酸面团发酵、葡萄酒酿造、动物饲料生产、工程菌构建中。