[发明专利]一种基于基因测序法的乙型肝炎病毒基因分型试剂盒无效
申请号: | 201110118215.X | 申请日: | 2011-05-09 |
公开(公告)号: | CN102181584A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 刘辉;刘亚莉;张敬磊;周伟平 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人: | 丁振英 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 基因 测序法 乙型肝炎 病毒 试剂盒 | ||
1.一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,该试剂盒包括HBV靶DNA扩增引物,该扩增引物是:
HBV DNA S基因上游引物序列如SEQ ID NO:1所示;
HBV DNA S基因下游引物序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,其特征在于该试剂盒还包括HBV DNA提取试剂、阴性对照和标准品、PCR反应液和PCR测序试剂。
3.根据权利要求2所述的一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,其特征在于其中的HBV DNA提取试剂为:pH8.0的10mmol/LTris-HCl、5mmol/L EDTA、0.5%SDS和150μg/ml蛋白酶K。
4.根据权利要求1或2所述的一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,其特征在于其中的阴性对照和标准品为:以去离子水为阴性对照,以已知型别的HBV样品为标准品。
5.根据权利要求1或2所述的一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,其特征在于其中的PCR反应液为:10×PCR Premix、0.25pmol/μl的引物、2.5-4.0mM的MgCl2、2U的Taq酶、0.2-0.4mM的dNTPs、0.3-0.6mM dUTP、通常取1-2μl的模板。
6.根据权利要求1或2所述的一种利用基因测序技术检测乙型肝炎病毒基因型的试剂盒,其特征在于其中PCR测序试剂为:4μl测序Buffer,1μl DNA模板,1μl测序引物。
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