[发明专利]HSP-GP96重组腺病毒载体及构建和应用无效
| 申请号： | 201110121306.9 | 申请日： | 2011-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN102242150A | 公开（公告）日： | 2011-11-16 |
| 发明（设计）人： | 童向民;姚航平;金洁 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;A61K48/00;A61K39/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 张法高;赵杭丽 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hsp gp96 重组 病毒 载体 构建 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种热休克蛋白-GP96重组腺病毒载体，所述载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的一种热休克蛋白-GP96重组腺病毒载体的构建方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
（1）设计上游引物SEQ ID NO:2：5’- GCAGATCT atgaagttgatgtgg atg-3’；下游引物SEQ ID NO:3：5’- CGAAGCTT ttacaattcatctttttC-3’，上游引物5’端包含BgLII酶切序列AGATCT，下游引物5’端包含Hind III酶切序列AAGCTT，扩增热休克蛋白-GP96基因序列；
（2）用BgLII和 Hind III双酶切PSC质粒和GP96基因PCR纯化物，经酶切连接后获得重组PSC- GP96穿梭载体；
（3）PmeI酶切使PSC- GP96和PSC-LacZ线性化，阳性重组腺病毒载体质粒的鉴定，片段在23kb以上者作PacI单酶切、BgLII和HindIII双酶切及PCR鉴定。
3.根据权利要求1所述的一种热休克蛋白-GP96重组腺病毒载体在制备针对白血病残留的瘤苗复合物中的应用。
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