[发明专利]活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法

权利要求书

1.一种活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法，其特征在于，包括：

步骤A，将加有保护液的活细菌悬液，在-10℃至20℃的温度，低于100Pa真空度下，进行动态控温下的真空干燥，将活细菌悬液的水分在4-6小时内降低至12％以下，活细菌悬液转变为固态的晶体薄片状的固态干燥物；

步骤B，将所述晶体薄片状的固态干燥物压碎，在10-25℃，真空度小于10Pa下，真空干燥2-4小时，将固态干燥物水分降至10％以下；

步骤C，将水分降至10％以下的固态干燥物研磨为粉末，然后在5-25℃，真空度小于10Pa下，进行4-6小时的真空干燥，将固态干燥物中的水分降至5％以下，制备得到活细菌生物材料。

2.根据权利要求1所述的活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法，其特征在于，所述细菌为霍乱弧菌或志贺氏菌。

3.根据权利要求1或2所述的活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法，其特征在于，所述步骤A包括如下步骤：

步骤A1，将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料离心收获后，与真空干燥保护液配制成细菌悬液，将所述细菌悬液均匀平铺；

步骤A2，在-10℃至20℃的温度，低于100Pa真空度下，使所述平铺的活细菌悬液在动态控温条件下真空干燥4-6小时，使所述活细菌悬液的水分蒸发至水分含量小于12％，收获得到固态的晶体薄片状的固态干燥物。

4.根据权利要求1或2所述的活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法，其特征在于，所述真空干燥保护液的成分为：20％-30％海藻糖，2-8％蔗糖，0.1-0.3％聚乙二醇，0.05％-0.1％氯化钠，0.01％-0.03％磷酸二氢钾，0.05％-0.1％磷酸氢二钠；

所述将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料离心收获后，与真空干燥保护液配制成细菌悬液，具体包括如下步骤：

将上述物质按比例称量后加入注射用水中，调整pH至7.0-8.0，接着用0.22um孔径的滤器无菌过滤至已灭菌的容器中得到真空干燥保护液，在温度为4℃下保存待用；

然后将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料，离心收获后倒入所述真空干燥保护液中，使用顶置搅拌器搅拌至形成均匀无块状颗粒的所述细菌悬液。

5.根据权利要求3所述的活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法，其特征在于，所述步骤A1中，将所述细菌悬液均匀平铺，包括如下步骤：

设定真空干燥机的进料泵转速为5rpm、真空干燥机的履带前进速率为0.01-0.02m/s，在常压下，真空干燥机的履带温度保持在4℃，进料时间为5-60min，将所述活细菌悬液泵入真空干燥机的履带上，使所述活细菌悬液在履带上均匀平铺一层至1-2mm。