[发明专利]活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法有效
申请号: | 201110125008.7 | 申请日: | 2011-05-13 |
公开(公告)号: | CN102776126A | 公开(公告)日: | 2012-11-14 |
发明(设计)人: | 吕亦晨;欧阳健;马伟 | 申请(专利权)人: | 海口维瑅瑷生物研究院 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 郑小粤 |
地址: | 570311 海*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细菌 生物 材料 阶段 真空 干燥 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物材料制备技术领域,特别是涉及一种活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法。
背景技术
活性生物材料如活细菌生物材料,在医药、生物制品中、食品等领域有着广泛的应用,而要长期保持活细菌生物材料处于存活状态,必须使其处于低水分状态才能实现,因此不同的干燥方法被应用其中,因为大多数的活细菌生物材料对热敏感,因此通常真空干燥和冷冻干燥工艺是在活细菌生物材料干燥领域中最常应用的两项技术。
真空干燥工艺是去除活细菌生物材料中水分的最佳方法之一,该方法相比其他的干燥方法的特点是干燥过程在不同的真空度条件下发生,并且始终处于低温下,能够最大程度地保持活细菌生物材料的活性。
但是,现有的活细菌生物材料真空干燥工艺处理时间较长,很难达到既保持活细菌较高的存活数而又能够去除大部分水分的工艺要求,而且现有制备工艺无法实现大规模的连续式生产,制备方法成本很高,无法实现大规模生物材料的真空干燥制备,实用性差。
发明内容
本发明的目的在于提供一种活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法,其工艺周期简短、节时节能,真空干燥后生物材料数损失小。
为实现本发明目的而提供的一种活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法,包括如下步骤:
一种活细菌生物材料多阶段式真空干燥制备方法,包括:
步骤A,将加有保护液的活细菌悬液,在-10℃至20℃的温度,低于100Pa真空度下,进行动态控温下的真空干燥,将活细菌悬液的水分在4-6小时内降低至12%以下,活细菌悬液转变为固态的晶体薄片状的固态干燥物;
步骤B,将所述晶体薄片状的固态干燥物压碎,在10-25℃,真空度小于10Pa下,真空干燥2-4小时,将固态干燥物水分降至10%以下;
步骤C,将水分降至10%以下的固态干燥物研磨为粉末,然后在5-25℃,真空度小于10Pa下,进行4-6小时的真空干燥,将固态干燥物中的水分降至5%以下,制备得到活细菌生物材料。
较优地,所述细菌为霍乱弧菌或志贺氏菌。
较优地,所述步骤A包括如下步骤:
步骤A1,将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料离心收获后,与真空干燥保护液配制成细菌悬液,将所述细菌悬液均匀平铺;
步骤A2,在-10℃至20℃的温度,低于100Pa真空度下,使所述平铺的活细菌悬液在动态控温条件下真空干燥4-6小时,使所述活细菌悬液的水分蒸发至水分含量小于12%,收获得到固态的晶体薄片状的固态干燥物。
较优地,所述真空干燥保护液的成分为:20%-30%海藻糖,2-8%蔗糖,0.1-0.3%聚乙二醇,0.05%-0.1%氯化钠,0.01%-0.03%磷酸二氢钾,0.05%-0.1%磷酸氢二钠;
所述将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料离心收获后,与真空干燥保护液配制成细菌悬液,具体包括如下步骤:
将上述物质按比例称量后加入注射用水中,调整pH至7.0-8.0,接着用0.22um孔径的滤器无菌过滤至已灭菌的容器中得到真空干燥保护液,在温度为4℃下保存待用;
然后将发酵培养至稳定前期的活细菌生物材料,离心收获后倒入所述真空干燥保护液中,使用顶置搅拌器搅拌至形成均匀无块状颗粒的所述细菌悬液。
较优地,所述步骤A1中,将所述细菌悬液均匀平铺,包括如下步骤:
设定真空干燥机的进料泵转速为5rpm、真空干燥机的履带前进速率为0.01-0.02m/s,在常压下,真空干燥机的履带温度保持在4℃,进料时间为5-60min,将所述活细菌悬液泵入真空干燥机的履带上,使所述活细菌悬液在履带上均匀平铺一层至1-2mm。
较优地,所述步骤A2中,所述动态控温条件如下表所示:
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