[发明专利]miR-24用于治疗或诊断心衰或患心衰倾向或者改善心肌细胞功能的方法

说明书

技术领域

本发明涉及MicroRNA领域。本发明还涉及心衰的诊断或治疗，特别是心衰的早期诊断或治疗。本发明还涉及用于筛选诊断或治疗心衰的药物的方法。 

背景技术

心力衰竭(简称“心衰”)是各种心血管疾病发展的最终阶段，主要表现为心脏泵血能力下降、全身体血液循环不能维持正常运行而出现的系列综合征。随着经济社会发展和人口老龄化进程，心衰的发病率有逐年上升的趋势。我国50家主要医院病例调查显示，心衰患者的住院数量占同期心血管疾病的20％，但死亡数量却占40％。2005年美国心脏病学会和美国心脏病学院(ACC/AHA)公布的心衰治疗指南指出：心衰的早期防治将是战胜心衰的关键。但如何在早期防治心衰还是个很新且尚未解决的医学问题。 

以往针对心衰发生、发展分子病理机制的研究多集中在心衰发病的中晚期，即心脏组织结构明显改变、心功能严重受损阶段。近年来临床研究提示，在心脏病变发生的早期(即心功能受损尚不十分明显的时期)进行诊断和干预，对于心血管疾病预后有着极其重要的影响。最近我们研究发现，在心衰发展的早期，当心脏泵血功能、心肌细胞收缩能力还没有明显异常的时候，细胞内分子水平的钙信号耦联已经出现了显著衰退。另一方面，传统的心衰治疗相关的研究策略集中在受体拮抗剂、炎症因子抑制剂、蛋白激酶的拮抗剂等方面。而近年来许多研究者开始意识到心肌细胞结构蛋白的改变在心衰发展中至关重要，是心衰治疗不容忽视的又一重要靶点。 

在细胞水平上，心肌兴奋-收缩耦联是钙致钙释放的过程。具体而言，心肌细胞膜(包括横管)分布着L-型钙通道(LCC)，由LCC流入细胞的Ca²⁺触发了雷尼丁受体(ryanodine receptor，RyR)的开放，肌质网释放更多Ca²⁺产生全细胞的钙瞬变。多数研究认为，心肌肥厚及心衰过程中LCC活性基本不变，但在多数失代偿性心肌肥厚(DHT)及心衰模型中，相同的LCC电流所触发的钙瞬变幅度降低、钙释放速度减缓，表明LCC电流触发RyR的效率降低。分子间耦联衰退不会影响细胞兴奋收缩耦联能力，只有分子间耦联衰退超出稳定裕度，心衰才会发生。潜性的分子间耦联衰退的发现对早期防治心衰有重要意义。 

Junctophilin蛋白家族是日本科学家Takeshima H等在2000年首次鉴定的，共有四种亚型，其中JP2在心肌和骨骼肌中特异性表达。近年来，对心肌细胞中JP2的研究主要集中在JP2与细胞兴奋收缩耦联的结构和功能上，尚处于起步阶段。 

在JP2与心衰关系的研究中还有一个重要的尚未解决的科学问题：即心衰过程中JP2表达水平下调的分子调控机制是什么。这种分子机制的揭示可否为心衰的防治提供新的线索呢？目前国内外尚未见调控JP2表达的分子机制的报道。 

MicroRNA(miRNA) 

MicroRNAs(miRNA)是一类小的、非编码蛋白的RNA(ncRNA)，它们大约为22个大小左右的核苷酸，在转录或转录后水平调控与其序列部分互补的靶mRNA的翻译或表达。miRNA作为一类小分子，几乎参与了人体一切生命活动的调节和所有疾病的发病过程。随着对miRNA功能广泛而深入的研究，miRNA在机体生理和病理过程中的重要作用，得到越来越多的认识。本文综述近来发现的一个重要miRNA--miRNA-24(在本文中也称为miR-24)的相关研究报道。 

在人类，miR-24-1和miR-24-2分别被位于九号染色体(9q22)和19号染色体(19p13)上的不同基因所编码。miR-24-1和miR-24-2 经过Drosha和Dicer等内切酶加工为序列一致的成熟体miRNA。 

miR-24在进化过程中高度保守，不同种属间同源性比较高，并且含量也是比较丰富的，特别在心脏和肺内高表达。 

根据目前已发表的研究结果，miR-24的作用如下： 

1.miR-24促进骨骼肌细胞的分化。(Nucleic Acids Research.2008.36.2690-2699.) 

2.在新生大鼠心肌细胞过表达miR-24，引起细胞肥大。(PNAS.2006.103.18255-18260.) 

3.miR-24在缺血预适应中表达上调。(Circ.Re s.2009；104；572-575.) 

4.miR-24在二氢叶酸还原酶基因上作用位点的多态性与甲氨蝶呤耐药的产生有关。(PNAS.2007.104.13513-13518.)